Hepatiitti C: n PCR-analyysi ja tulosten tulkinta

Hepatiitti C on vakava virustauti, jota esiintyy potilaan kehossa bakteerien, kuten HCV: n, vaikutuksen alaisena. Tällaisesta patologiasta voi kehitysvaiheesta riippuen ilmetä ilman oireita tai ilmennä keltaisuus, vähentynyt aktiivisuus ja muut toiminnalliset häiriöt. Samaan aikaan tämä sairaus voidaan parantaa vain muutaman ensimmäisen viikon aikana, kun taas sen patogeeni on inkubaatiokaudella. Alkuvaiheessa hepatiitti C: n laadullinen analyysi voi diagnosoida tartunnan..

Yleisiä tietoja hepatiitista C

C-luokan hepatiittia pidetään vaarallisimpana kaikentyyppisistä viruspatologioista, koska sen herkkyys mutaatioille on erittäin korkea. Kun RNA: n komponentit ovat elimistössä, ne muuttavat jatkuvasti rakennettaan, minkä vuoksi immuunijärjestelmä ei pysty tuottamaan itsenäisesti oikeita vasta-aineita taudin luonnolliseen paranemiseen. Tämä mahdollistaa tartunnan leviämisen ilman paljon esteitä..

Muutaman viikon kuluttua virus muuttuu sellaiseen tilaan, että ihminen alkaa tuntea ensimmäisiä oireita, jotka ilmenevät muodossa:

  • Määräaikainen huimaus;
  • Pahoinvointi tai jopa oksentelu;
  • Krooninen väsymys;
  • Kipu oikeassa hypochondriumissa;
  • Kuume.


Pahenemisvaiheen jälkeen tauti muuttuu krooniseksi. Lääkehoidon avulla potilas voi tukea häntä vain inkubaatiokaudella välttäen toistuvia uusiutumisia.

Diagnoosin indikaatiot

Hepatiitti C -viruksen RNA-solujen laadullista tutkimusta ei suoriteta potilaan pyynnöstä, indikaatiot tällaisesta toimenpiteestä voivat toimia vain:

  • Biopsiaa käyttäen kasvatettujen kudosten tutkimus;
  • Leukemian ja pahanlaatuisten kasvainten tutkimus;
  • Kehon diagnoosi geneettisten patologioiden esiintymiseksi siinä;
  • Henkilön tunnistaminen vertaamalla potilaan kehon nesteitä saatavilla oleviin biomateriaaleihin;
  • Virustartunnan aiheuttajan havaitseminen (sekoitetun hepatiitin kanssa).

Lisäksi RNA-analyysi voi näyttää arvioinnin nykyisen hoitojakson tehokkuudesta, mikä on erittäin tärkeää virussairauden hoidossa.

Mikä on PCR-analyysi?

Polymeraasiketjureaktion tutkimus on veren perusteellinen analyysi, joka suoritetaan viruksen RNA-solujen havaitsemiseksi. Suunnasta riippuen tämä menettely voi näyttää:

  • Hepatiitin esiintyminen tai puuttuminen kehossa (laadullinen PCR-tyyppi);
  • Immuunijärjestelmän viruskuorma (kvantitatiivinen testi, joka osoittaa ribonukleiinihapon pitoisuuden veressä);
  • Sairauden nykyinen genotyyppi (genotyypitys).

Kaikista yllä olevista testeistä vain ensimmäinen suoritetaan ilman epäonnistumisia. Salauksen purkamisen tulosten perusteella lääkäri pystyy selvittämään lisätietoja nykyisestä sairaudesta.

Tutkimuksen tärkeimmät edut

Jos vertaamme PCR-analyysiä sellaisiin menetelmiin kuin: UAC, ELISA ja ultraääniskannaus, ensimmäisellä testillä on useita ominaisia ​​etuja:

  • Nopea käsittelytulos;
  • Kyky tutkia melkein kaikkia ihmisen biologisia nesteitä (hikeä, kyyneleitä, verta, raapimista limakalvosta ja jopa ihon epiteelistä);
  • Viruskuorman indikaattorin esiintyminen;
  • Testimateriaalin täydellinen desinfiointi (tällainen menettely suoritetaan ennen PCR-analyysin aloittamista saadun nesteen aiheuttamien infektioiden estämiseksi);
  • Korkea tietosisältö (tämä reaktio osoittaa viruksen esiintymisen lisäksi myös sen luonteen).

On tärkeää tietää! Hepatiitti C: n PCR-testin ainoa haittapuoli on henkilöstön ja laitteiden monimutkaisen koulutuksen tarve.

Laadullinen PCR hepatiitti C: lle

Hepatiitti C: n korkealaatuisen PCR-tuloksen tulos on koko tutkimuksen perusindikaattori, koska sen ansiosta lääkäri voi selvittää patologian esiintymisen potilaassa. Mutta kielteinen vastaus yllä olevaan reaktioon ei aina tarkoita täysin tervettä vartaloa. Itse asiassa, jos RNA-solujen määrä laskee alle hyväksyttävän tason, PCR-skannaus yksinkertaisesti ei huomaa niitä.

Analyysitulosten salauksen purku

Laadullinen PCR-testi hepatiitti C -solu-RNA: n esiintymiseksi voi näyttää vain kaksi mahdollista vastetta. Harkitse arvoja, jotka osoittavat ihmisen normaalin tilan ja meneillään olevan patologian.

Normi

Normaali indikaattori polymeraasiketjureaktion laadullisessa tutkimuksessa on negatiivinen testitulos. Se havaitaan viruskuorman nolla-arvolla ja havaitun genotyypin puuttuessa. Mutta turvallisuuden täydelliseksi tarkistamiseksi on parempi, että potilas käy läpi useita lisätoimenpiteitä, joilla voidaan tunnistaa hepatiitti C -infektioon johtavat sairaudet..

poikkeamat

Jos PCR-testi osoitti positiivisen vastauksen, se on selvä merkki viruksen esiintymisestä tutkittavan henkilön kehossa. Kvantitatiivisesta arvosta (1,8 x 2,4 x) riippuen lääkäri pystyy määrittämään sen kehitysvaiheen, joka on ensimmäinen askel oikean hoidon suunnittelussa. Ja genotyyppien avulla voidaan havaita hepatiitin luokka jo ennen sen ominaisia ​​oireita (indikaattorit B1, B2 tai B3).

Väärät positiiviset ja väärät negatiiviset tulokset

Itse PCR-testi ei ole melkein koskaan erehtynyt. Mutta inhimillisen tekijän vaikutuksesta väärän diagnoosin todennäköisyys kasvaa merkittävästi. Siksi, jotta saadaan oikein dekoodaus, ennen polymeraasiketjureaktion suorittamista on otettava huomioon seuraavat säännöt:

  1. Kaikkien tutkittujen biomateriaalien tulisi olla kohtuullisen etäisyydellä toisistaan ​​(mahdollisten biokomponenttien yhdistelmä aiheuttaa aina väärän positiivisen tuloksen);
  2. Saadut nesteet on tarpeen varastoida ja kuljettaa analysointia varten erityisissä suojatuissa astioissa, joissa lämpötilatila noudatetaan (biologiset komponentit menettävät helposti ominaisuutensa, mikä aiheuttaa myös väärän diagnoosin);
  3. Ennen kuin työskentelet biomateriaalien kanssa, laboratoriotila on käsiteltävä hyvin niin, että jätettä ei pääse testinesteeseen.
  4. Vanhentuneiden reagenssien käyttö on ehdottomasti kielletty (tällainen huolimattomuus ei ole harvinaista nykyaikaisissa lääketieteellisissä laitoksissa).

On tärkeää tietää! PCR-tuloksen oikeellisuus voi riippua potilaasta itsestään, jos hän ei noudata verinäytteen valmistelua koskevia sääntöjä. Jokaisen näiden tilanteiden tulos on toinen analyysi.

PCR-analyysin tiheys

Nykyaikainen lääketiede ei aseta rajoituksia korkealaatuiselle PCR-analyysille hepatiitti C: lle. Mutta he suorittavat tämän toimenpiteen jokaiselle potilasryhmälle tietyn kerran. Nimittäin:

  • Ihmisille, joiden kehossa ei ole patologiaa - enintään 1-2 kertaa vuodessa;
  • Potilaat, jotka ovat hoitamassa C-hepatiittia - 2 kertaa (ennen hoidon aloittamista ja lähempänä sen keskiosaa);
  • Raskaana olevat naiset - vähintään 1 - 2 kertaa kuukaudessa sikiön kantamisjakson aikana (testi tehdään enintään 2 kertaa vuodessa);
  • Useiden viikkojen ikäiset vauvat - vähintään 2 kertaa vuodessa.

Turvallisuudestaan ​​johtuen PCR-menetelmää käytetään usein jopa vastasyntyneille, jota pidetään toisena merkittävänä etuna..

Polymeraasiketjureaktion kustannukset eroavat selvästi tavanomaisista tutkimuksista. Tämän vuoksi joillakin ihmisillä ei ole varaa siihen. Mutta muiden kriteerien mukaan tällä testillä ei ole kilpailijoita, joten lääkärit suosittelevat sitä useimmiten..

PCR hepatiitti C: lle

PCR - moderni C-hepatiitin diagnoosi

Virushepatiitti C on yksi salaperäisimmistä maksasairauksista. Se on pitkään oireeton, mikä johtaa krooniseen prosessiin (80%: ssa). Useimmissa tapauksissa se päättyy maksafibroosiin, joka virtaa maksakirroosiin tai elimen kasvaimeen.

Erityisen tärkeitä ovat taudin varhaisen diagnosoinnin menetelmät. Polymeraasiketjureaktion (PCR) avulla voit diagnosoida muutaman päivän infektion jälkeen.

Lyhyesti virus C-hepatiitista

Patogeeni - RNA, joka sisältää viruksen, jolla on useita alatyyppejä. Se tunkeutuu ihmiskehoon veren kautta: seksuaalisesti, verensiirron, injektioiden ja muiden invasiivisten lääketieteellisten toimenpiteiden kautta.

Taudin akuutissa muodossa ei ole merkittäviä oireita. Joskus oikeassa hypochondriumssa on vakavuus, jota useimmat potilaat eivät huomaa.

Krooninen muoto johtaa kaikkien maksatoimintojen rikkomiseen: päihtyminen, vatsakipu, keltaisuus, nivelkipu ja monet muut. Tässä vaiheessa prosessista tulee peruuttamaton..

Usein kroonisesta hepatiitista C tulee maksakudoksen pahanlaatuisen rappeutumisen edeltäjä.

PCR-menetelmän ydin

PCR: llä viruksen RNA määritetään 5 päivää infektion jälkeen. Tänä aikana immuunivastetta ei ole vielä käynnistetty, serologisen testin tulokset ovat negatiiviset, kliiniset oireet puuttuvat kokonaan.

PCR-diagnostiikka antaa mahdollisuuden tehdä diagnoosi sairauden varhaisessa vaiheessa, kun riittävä hoito parantaa merkittävästi potilaan ennustetta. PCR-menetelmiä on kahta tyyppiä - kvalitatiivinen ja kvantitatiivinen.

Laadukas tekniikka

Tunnistaa C-hepatiitin viruksen geneettisen materiaalin minimaalisena määränä. Tulos on kahta tyyppiä:

  1. "Löydetty" - positiivinen reaktio, joka osoittaa sairauden esiintymisen ihmisissä.
  2. ”Ei havaittu” - negatiivinen analyysi, joka osoittaa tartunnan puuttumisen tai viruksen esiintymisen niin pieninä määrinä, joita tällä menetelmällä ei ole vahvistettu. Tämä ei anna 100% todennäköisyyttä siitä, että potilaalla ei ole virushepatiitti C: tä.

Analyysiin käytetään useimmiten verta, mutta sylki, siemenneste ja muut biologiset nesteet ovat myös sopivia..

PCR hepatiitti C: lle

Määrällinen tekniikka

Tämä on monimutkaisempi ja kalliin menetelmä, joka suoritetaan tiettyjen ohjeiden mukaan:

  1. Diagnoosin vahvistaminen positiivisella kvalitatiivisella PCR: llä ja spesifisten vasta-aineiden havaitseminen.
  2. Yhdistetyn viruspatologian tapauksessa (hepatiitti C-virus "vierekkäin" usein samoilla tavoilla leviävän hepatiitti B: n kanssa).
  3. Hoidon tehokkuuden seuranta. Voit tehdä tämän selvittääksesi viremian tason ennen hoitoa, sen jälkeen 4, 12, 24 hoitoviikolla. Jos virustaso ei laske 12 viikossa kahdella logaritmisella yksiköllä, lääke valitaan väärin.
  4. Diagnoosi siirtymästä akuutista krooniseen.

Virusyksiköiden lukumäärä lasketaan testinesteen tilavuusyksikköä kohti (yleensä 1 ml). Tulos ilmaistaan ​​IU / ml tai viruksen RNA: n kopiomäärinä 1 ml.

Se osoittaa viruskuorman voimakkuuden kehossa. Mitä korkeampi tämä arvo, sitä suurempi on todennäköisyys viruksen leviämisestä muille ihmisille. Maksan vaurioiden vakavuus ei riipu viremian tasosta. Tätä varten on olemassa lukuisia ns. Maksatutkimuksia..

Opintojen valmistelu

Useimmat väärin negatiiviset analyysit johtuvat analyysitekniikan noudattamatta jättämisestä. Tämän välttämiseksi on noudatettava seuraavia sääntöjä:

  1. Sulje pois epäpuhtaudet pääsystä biomateriaaliin (ehdoton steriiliysolosuhteet).
  2. Hepariinin vähimmäispitoisuus veressä, jota käytetään hyytymisen estämiseen tai jota määrätään potilaalle terapeuttisiin tarkoituksiin, vaikuttaa PCR-tulokseen. On tärkeää selventää tämä asia potilaan kanssa etukäteen..
  3. Estä ympäristöstä aineet, jotka neutraloivat entsyymejä PCR-testijärjestelmissä.

Kaikki nämä vaatimukset liittyvät laboratorioapulaisten ja lääkäreiden toimintaan. Potilaan ei tarvitse valmistautua erityisesti. Yleensä he luovuttavat verta tyhjään vatsaan, sulkevat pois alkoholin.

PCR: n edut

Hepatiitti C: n kattavassa tutkimuksessa polymeraasiketjureaktio on ensinnäkin monien etujen takia:

  1. Patogeenin suora eristäminen kyvyllä tunnistaa sen alatyyppi. Muissa tapauksissa (serologiset reaktiot) tutkitaan immuunijärjestelmän reaktio virukseen..
  2. Tekniikan korkea spesifisyys. Väärien positiivisten tai väärien negatiivisten tulosten saamisen todennäköisyys on minimoitu (lähinnä, kun tutkimuksen tekniikkaa rikotaan).
  3. Yliherkkyys. Useimpien laboratorioiden ja testijärjestelmien herkkyys on vähintään 50 IU / ml. On ultra-PCR, jossa tämä luku on 10 IU / ml. Tämä tarkoittaa, että hepatiitti C-virus voidaan havaita infektion varhaisina päivinä..
  4. Universaalisuus. PCR-menetelmällä useat hepatiitin patogeenit havaitaan heti, jos niitä on.

TÄRKEÄ! Virukset, joiden genotyyppi vaihtelee suuresti (hepatiitti C, influenssa) "sekoittaa" immuunijärjestelmän, mikä johtaa serologisten testien sumeaan indikaattoriin (spesifisten vasta-aineiden havaitsemiseen). Vain PCR antaa tarkan vastauksen patogeenin genotyypin esiintymisestä kehossa.

Tulosten tulkinta

Hepatiitti C: n PCR suoritetaan yleensä vasta-aineiden serologisten testien jälkeen. Potilaille vaikein on menetelmän kvantitatiivisen version tulkinta. Yritetään selvittää tämä..

Jos tulos esitetään IU / ml, tulokset kuvataan seuraavasti (tiedot koskevat venäläisiä laitteita ja testijärjestelmiä):

Virus-RNA: n määräTulkinta
Ei havaittuNormi ​​(jos muita kliinisiä tai laboratoriooireita ei ole) tai viruksen määrä alle tämän menetelmän herkkyysrajan
Alle 1,5 x 10 3Luku on "lineaarisen alueen alapuolella", mikä tarkoittaa patogeenin esiintymistä kehossa, mutta ilman mahdollisuutta kuvata viruskuormitusta määrällisesti
Alle 4 x 10 6Virus-RNA havaittu, viremia alhainen (ennuste on suotuisa)
Yli 4 x 10 6Virus-RNA havaittu, viremia korkea
Yli 2 x 10 8Pitoisuus on korkea, lineaarisen alueen yläpuolella, mikä tarkoittaa erittäin suurta viruskuormitusta, jota nykyaikaiset mittauslaitteet eivät kuvaa (epäsuotuisa ennuste).

Taulukko näyttää tulkintavaihtoehdon vain yhdelle venäläisten testijärjestelmien versioille. Jokainen laboratorio voi käyttää omia laitteitaan, jolloin arvoissa on ero. Yleensä tulos annetaan joko valmiilla dekoodauksilla tai osoittamalla normaaliarvojen rajat.

PCR: n tulkinnan piirteet

Hoidon aloittamisen ajankohta riippuu analyysitulosten oikeasta tulkinnasta, mikä on hepatiitti C: n tapauksessa potilaalle välttämätöntä.

On olemassa useita tekijöitä, jotka vaikuttavat analyysitulosten dekoodaukseen:

  • Laitteiden laatu ja testijärjestelmien herkkyys. Tähän päivään mennessä yleisin Cobas Ampicolor HCV-Test ja RealBest HCV RNA. Niiden herkkyys on vähintään 50 IU / ml. Tämä tarkoittaa, että jos virusta on pienemmässä konsentraatiossa (esimerkiksi tartunnan ensimmäisinä päivinä), tutkimuksen tulos on negatiivinen ja tauti etenee ilman hoitoa. Viime aikoina on ilmestynyt erittäin herkkiä diagnostiikkajärjestelmiä (vähintään 10 IU / ml). Ne parantavat merkittävästi diagnoosin laatua. Tällaisen PCR: n kustannukset vaihtelevat suuresti - 1800 - 10 tuhatta ruplaa laboratoriosta riippuen.
  • Lopullinen diagnoosi tehdään vasta kolmen erilaisen biologisen nesteen tutkimuksen jälkeen. Jos tulos on negatiivinen kolme kertaa, potilaan kehossa ei ole hepatiitti C-virusta.
  • Menestyksekkään hoidon kannalta on välttämätöntä paitsi vahvistaa virustartunnan tosiasia, myös määrittää sen alatyyppi: 1a, 1c, 2a, 2c, 2c, 3, 4, 5a, 6..
  • Tulokset arvioidaan kahdessa yksikössä: ME / ml ja RNA / ml kopiomäärä. Niiden lukumäärä eroaa tarkalleen 4 kertaa, mitä sinun on muistettava, kun saat analyysitulokset käsillä.

Asiantuntijoiden tulisi tulkita virushepatiitti C: n PCR-reaktiota. Lääkäri ymmärtää kvantitatiiviset indikaattorit ja osaa verrata laboratoriotulosten vastaavuutta kliiniseen kuvaan.

Joskus on vääriä positiivisia tai vääriä negatiivisia testivaihtoehtoja, ja vain kattava potilaan tutkimus antaa sinun "unohtaa" tämän vakavimman maksasairauden..

Hepatiitti C: n (hepatiitti C RNA) PCR-analyysi

PCR-analyysi

Laadullinen analyysi osoittaa viruksen esiintymisen veressä. Tämä testi tulisi suorittaa kaikille potilaille, joilla on havaittu hepatiitti C -vasta-aineita. Sen tulos voidaan “havaita” tai “ei havaita”. Viitearvoja (arvon, jonka pitäisi olla normaali) ei ole havaittu. Tulos "havaittu" voi tarkoittaa, että virus lisääntyy ja tartuttaa kaikki uudet maksasolut. Laadullisella PCR-testillä on tietty herkkyys (10-500 IU / ml). Tämä tarkoittaa, että jos virus esiintyy veressä erittäin alhaisena pitoisuutena (menetelmän herkkyyskynnyksen alapuolella), tulosta "ei havaittu" voidaan saada. Siksi suoritettaessa korkealaatuista PCR-tutkimusta potilailla, joilla on alhainen viremia (viruskonsentraatio), esimerkiksi hoidettaessa viruslääkitystä, on tärkeää tietää diagnoosijärjestelmän herkkyys. Virologisen vasteen hallitsemiseksi viruslääkityksen aikana on suositeltavaa käyttää diagnoosijärjestelmää, jonka herkkyys on vähintään 50 IU / ml. Esimerkiksi COBAS AMPLICOR HCV-TEST -analysaattorit (analyyttinen herkkyys 50 IU / ml tai 100 kopiota / ml), RealBest HCV RNA (analyyttinen herkkyys 15 IU / ml tai 38 kopiota / ml) ja muut.

Missä on turvallista ostaa uusia hepatiitti C -lääkkeitä? Mielestämme optimaalisin ja luotettavin tapa on käyttää todistettujen toimittajien palveluja vuosien ajan foorumillamme, jotka ovat jo auttaneet satoja potilaita pääsemään eroon tästä sairaudesta.

PCR-kustannukset

PCR-analyysi, jonka hinta riippuu käytetyistä reagensseista ja voi vaihdella 300 ruplasta. jopa 5000 ruplaa., suoritetaan päivästä viikkoon.

PCR-menetelmän lisäksi transkriptionaalista monistusmenetelmää (TMA) käytetään myös HCV-RNA: n havaitsemiseen, jolla on parempi herkkyys (noin 5-10 IU / ml), mutta tämä menetelmä ei ole vielä levinnyt Venäjällä.

Kuinka usein sinun täytyy tehdä hepatiitti C-PCR? Yleensä se suoritetaan hepatiitti C -vasta-aineiden havaitsemisen jälkeen ja viruksenvastaisen hoidon 4., 12., 24. viikon jälkeen, sekä 24 viikkoa OEM-valmisteen loppuunsaattamisen jälkeen, ja sitten SVR: n tapauksessa vuosittain..

Kuva. 1. Esimerkki hepatiitti C: n korkealaatuisen PCR: n tuloksista.

PCR: n (viruskuormituksen) kvantitatiivinen analyysi on testi viruksen (viremian) pitoisuudelle veressä. Viruskuorma on geneettisen materiaalin (virus-RNA) yksikköjen lukumäärä, joka on läsnä määrätyssä veritilavuudessa (yleensä 1 ml, joka vastaa 1 kuutiometriä). Tämä määrä ilmaistaan ​​numeroina, mittayksikköinä ME / ml (kansainväliset yksiköt millilitrassa). Viruksen määrä voidaan näyttää eri tavoin. Esimerkiksi 1,5 miljoonaa IU / ml, mikä vastaa 1 500 000 IU / ml tai 1,5 * 106 IU / ml. Joissakin laboratorioissa käytetään muita mittayksiköitä - kopiot / ml. Muuntamisaste kopioista kansainvälisiin yksiköihin on erilainen eri testijärjestelmille. Arviot voidaan laskea kaavan 1 IU / ml = 4 kopiota / ml mukaan, esimerkiksi 5,5 * 10 5 IU / ml = 2,2 * 106 6 kopiota / ml.

Mitä viruskuorma vaikuttaa??

Ensinnäkin tarttuvuudesta. Mitä korkeampi viruksen konsentraatio, sitä suurempi on viruksen leviämisriski esimerkiksi seksuaalisen kontaktin tai vertikaalisesti. Toiseksi viruksen pitoisuus vaikuttaa hoidon tehokkuuteen (jos hoito suoritetaan interferonin perusteella). Siten pieni viruskuormitus on suotuisa tekijä hoidon aikana ja erittäin korkea haitallinen tekijä. Kvantitatiivisella PCR: llä on myös suuri merkitys suoritettaessa interferonihoitoa sen onnistumisen arvioimiseksi ja kurssin keston suunnittelemiseksi. Joten nopea vaste hoitoon ja pieni viremia ennen hoitoa, hoitoaikaa voidaan lyhentää. Päinvastoin, kun viruksen konsentraatio laskee hitaasti, AVT voidaan pidentää.

Mitä kuormaa pidetään alhaisena ja mitä korkeaa?

Suuri katsotaan kuormaksi yli 800 * 10 3 tai 800 000 ME / ml, mikä on noin 300 * 10 4 tai 3 000 000 kopiota / ml. Kuorman, joka on yli 1 * 107 ME / ml, pidetään erittäin suurena. Toistaiseksi asiantuntijoiden keskuudessa ei kuitenkaan ole yleistä mielipidettä arvoista, jotka erottavat korkean ja matalan viremian. Joten joissain teoksissa luku on 400 000 ME / ml..

Kuinka usein sinun on tehtävä kvantitatiivinen testi??

Se tehdään yleensä ennen hoitoa ja 12. hoitovuoden jälkeen sen tehokkuuden arvioimiseksi, jos RNA määritetään edelleen kvalitatiivisella testillä..

Kvantitatiivisen testin tulos voi olla viremian kvantitatiivinen arviointi edellä kuvatussa muodossa, samoin kuin tulokset "mittausalueen alapuolella" ja "ei havaittu".

Kvantitatiivisen PCR: n herkkyyskynnys on yleensä korkeampi kuin kvalitatiivinen. Joten COBAS AMPLICOR -järjestelmässä se on 600 ME / ml. "Ei havaittu" tulos voi tarkoittaa, että kvantitatiivinen testi ja varmentava laadullinen testi eivät havainneet virus-RNA: ta. Tulos ”mittausalueen alapuolella” tarkoittaa, että kvantitatiivinen testi ei paljastanut hepatiitti C-RNA: ta, mutta virusta on läsnä erittäin alhaisessa pitoisuudessa (jos samanaikaisesti suoritettiin ylimääräinen varmentava laadullinen testi).

Kuva 2 Esimerkki kvantitatiivisesta testituloksesta..

Hepatiitti C: n PCR-analyysi

Hepatiitti C on vakava sairaus, joka tuhoaa maksan. Se voi johtaa maksakirroosiin. Taudin puhkeamisen ja vasta-aineiden tuotannon alkamisen välillä voi kulua jopa kuusi kuukautta, joten on mahdotonta diagnosoida tautia entsyymisidonnaisella immunosorbenttimäärityksellä. Taudin oikea-aikainen analyysi ja hoidon aloittaminen auttavat hepatiitti C: n PCR-analyysiä.

Indikaatiot tutkimukselle

Kun sinun on läpäistävä analyysi:

  • jos entsyymin immunomääritys antoi positiivisen tuloksen;
  • potilaalla on maksakirroosin tai maksavaurion oireita: sen koko muuttuu, perna kasvaa, vatsassa on laajentuneita suonia, iho muuttuu keltaiseksi, vatsan oikealla puolella havaitaan kipuja;
  • ALT: n ja ASAT: n aktiivisuus verikokeessa lisääntyy;
  • ennen hoidon aloittamista viruksen määrän määrittämiseksi tartunnan saaneen henkilön veressä;
  • nähdäksesi kuinka tehokas terapia on ollut. Hoidon jälkeen - seurata terveydentilaa ja välttää uusiutumista;
  • jos hepatiitti B diagnosoidaan sekalaisten maksavaurioiden sulkemiseksi pois;
  • yhdynnän jälkeen hepatiitti-tartunnan saaneen henkilön kanssa.

Kyselyn tavoitteet

PCR: n (tai polymeraasiketjureaktion) tarkoituksena on tutkia veren koostumusta ja havaita flavivirus (hepatiitti C). Tämän analyysin merkittävä etu on, että se tunnistaa viruksen siinä vaiheessa, kun se ei ole vielä alkanut peruuttamattomien reaktioiden prosessia. PCR antaa sinun nähdä, kuinka pahasti elimistöön vaikuttaa, osoittaa laadulliset ominaisuudet ja määrittää viruksen genotyypin. Tämän avulla voit määrätä sopivimman hoidon kullekin erityistapaukselle..

Monipuoliset analyysit

PCR hepatiitti C: n havaitsemiseksi sisältää useita tutkimuksia:

  • laadullinen analyysi;
  • kvantitatiivinen analyysi;
  • genotyypitys.

Laadullinen analyysi

PCR: ää kutsutaan myös kvalitatiiviseksi analyysiksi. Jos se osoittaa negatiivisen tuloksen, virusta ei voida tunnistaa kehossa, koska sen pitoisuus on pienempi kuin laite pystyy tarttumaan. Tällaisessa tilanteessa on välttämätöntä määrittää, kuinka herkkä reagenssi on, jotta voidaan säätää lisäliuos..

Analyysi voi osoittaa positiivisen tuloksen noin viidessä päivässä ihmisen tartunnan jälkeen.

Kvantitatiivinen analyysi

Tämäntyyppinen analyysitutkimus osoittaa viruskuormituksen tason, ts. Flaviviruksen pitoisuuden kehossa - kuinka monta viruksen fragmenttia on 1 kuutiometriä kohti potilaan verta.

Tämän tyyppinen PCR-analyysi määrätään potilaalle ennen viruslääkityksen aloittamista tai kolmen kuukauden hoidon jälkeen nähdäkseen, kuinka tehokas määrätty kurssi on..

Tämäntyyppinen analyysi osoittaa:

  • kuinka suuri on toisen henkilön tartunnan vaara, tämä todennäköisyys on suoraan verrannollinen viruskuormituksen indikaatioihin;
  • mikä hoito sopii tässä tapauksessa ja kuinka hedelmällinen se on;
  • hoidon kesto - mitä korkeampi virusten konsentraatio, sitä pidempi hoito on.

Potilaan tulee tietää, että taudin vakavuus ei välttämättä riipu viruskuorman tasosta. Joskus maksa jopa vaurioituu vain hieman, vaikka potilaan veressä on runsaasti viruksia. Kuitenkin, jos raskaana olevalla naisella on korkea viruskuormitus, se todennäköisesti välittää taudin lapselleen.

Uskotaan, että RNA-viruksen pitoisuuden alempi normi on 600 000 IU / ml, keskimäärin 600 000 - 700 000, korkea on 800 000 ja korkeampi.

genotyypitys

Koska tämä virus on herkkä suurille mutaatioille, on erittäin tärkeää määrittää, mikä genotyyppi on ihmisen veressä tutkimuksen aikana. Hepatiitti C: tä on kaikkiaan 11 genotyyppiä ja monia niiden alalajeista. Mutta Venäjällä vain kolme on yleistä: 1, 2 ja 3.

Genotyypin määrittäminen mahdollistaa viruksen resistenssin määrittämisen. Hoitomenetelmä riippuu siitä..

Kaikki hepatiitti C -genotyypit reagoivat hoitoon eri tavalla. 1 genotyyppiä hoidetaan vähintään vuoden ajan, ja mahdollisuus toipumiseen on noin 60%. Genotyyppejä 2 ja 3 hoidetaan kuuden kuukauden ajan, ja todennäköisyys päästä eroon taudista on noin 85%.

Lisäksi genotyypin määrittäminen antaa mahdollisuuden nähdä, missä tilassa potilaan maksa on. Esimerkiksi rasvan kertyminen maksaan osoittaa, että potilas kärsii viruksen 3 genotyypistä.

Tässä vaiheessa suoritettu verikoe näyttää genotyypille luonteenomaisen luvun. Toisinaan genotyyppiä ei ole mahdollista määrittää, ja laboratoriossa saadut vastaukset ilmaisevat ”ei kirjoitettu”. Tämä tarkoittaa, että henkilö kärsii genotyypistä, joka ei ole yleinen tällä maantieteellisellä alueella. Tunnistaaksesi se, sinun on läpäistävä analyysi uudelleen, mutta diagnoosijärjestelmällä, joka tunnistaa sen.

Salauksen purkuprosessi

Laboratoriosta saaduissa hepatiitti C: n PCR-analyyseissä tietyt tiedot ilmoitetaan yleensä, ja voit jopa purkaa ne itse:

  • havaittu / ei havaittu (laadullinen analyysi);
  • virusten lukumäärä (kvantitatiivinen analyysi);
  • genotyypin numero;
  • testin nimi.

Uskotaan, että eniten huomiota tulisi kiinnittää toiseen kohtaan, koska näiden indikaattorien perusteella voit tehdä ennusteen, määrittää hoidon keston ja tyypin.

Huolimatta analyysin selkeydestä, et voi itsenäisesti diagnosoida ja itsehoitaa, analyysin tulokset on osoitettava hoitavalle lääkärille.

Kuinka valmistautua analyysiin

Luotettavan tuloksen saamiseksi on tärkeää noudattaa useita sääntöjä:

  1. Testit kannattaa ottaa aamulla tyhjään vatsaan (yritä syödä viimeistä kertaa vähintään 8 tuntia ennen toimenpidettä).
  2. Älä juo mitään muuta kuin vettä ennen kuin luovutat verta.
  3. Kaksi päivää rasvaisten ja paistettujen ruokien sekä alkoholin poistamiseksi.
  4. Ainakin tunti on parempi luopua savukkeista.
  5. Testien tekemistä hieronnan, ultraäänitiedon tai röntgenkuvauksen jälkeen ei suositella.
  6. Päivää ennen tutkimusta potilaan tulee luopua lääkityksestä, fyysisestä aktiivisuudesta ja tunne stressistä.
  7. Puoli tuntia ennen tutkimusta tulisi olla rauhallinen ja rento..

PCR-tutkimuksen nopeuteen vaikuttaa se, minkä tyyppisestä viruksesta potilas kärsii ja millä menetelmällä verikoe suoritetaan. Monimutkaisuudesta riippuen potilas voi saada testitulokset muutamassa tunnissa tai useissa päivissä. Mutta yleensä se ei vie yli 7 päivää.

PCR-testin hintaan vaikuttaa klinikan tila, mihin potilas menee ja kuinka vaikeaa analyysi on. Hinta vaihtelee 400 ruplasta 11 tuhanteen.

Potilaan on tärkeää tietää, että on olemassa negatiivisia vääriä testejä. Näin voi käydä, jos analysoitava veri on tehty väärin, sääntöjen vastaisesti tai kuljetettu sopimattomasti (esimerkiksi hänet vietiin laboratorioon yli kahden tunnin kuluttua keräämisestä). Tällaisessa tilanteessa potilaalla on riski saada virheellinen käsitys terveydentilastaan ​​ja menettää arvokasta aikaa.

Siksi on erittäin tärkeää valita sopivin klinikka, joka välittää maineestaan ​​ja jolla ei ole varaa laiminlyödä potilaita. Ennen päätöksentekoa on syytä lukea arvosteluja laitoksesta ja sen henkilöstöstä. Valinta on parempi pysähtyä arvostettuun ja tunnettuun klinikkaan - virheen todennäköisyys on tässä tapauksessa pieni.

Hepatiitin PCR-diagnoosi

Hepatiitin PCR-diagnostiikan hinnat

  • Hepatiitti C -viruksen genotyypin (HepAtitis C virus) määrittäminen 1660 hiero.
  • Hepatiitti B -viruksen (HepAtitis B -viruksen) DNA: n määrittäminen veressä PCR: llä, laadullinen tutkimus, 520 ruplaa.
  • Hepatiitti B -viruksen (HepAtitis B -viruksen) DNA: n määrittäminen veressä PCR-menetelmällä, kvantitatiivinen tutkimus 1560 hieroa.
  • Hepatiitti C -viruksen RNA: n (HepAtitis C-virus) määrittäminen veressä PCR-menetelmällä, laadullinen tutkimus 570 hieroa.
  • Hepatiitti C -viruksen RNA: n (HepAtitis C-virus) määrittäminen veressä PCR-menetelmällä, kvantitatiivinen tutkimus 2600 hieronta.

Polymeraasiketjureaktio (PCR) on yksi diagnostiikkamenetelmistä, jolla voidaan saavuttaa merkittävä kasvu tiettyjen nukleiinihappofragmenttien (DNA / RNA) pienissä pitoisuuksissa biologisessa materiaalissa (näytteessä) käyttämällä DNA-polymeraasientsyymiä.

Maailman terveysjärjestön mukaan yli 2 miljardia ihmistä on saanut tartunnan hepatiitti B-viruksella (HBV); viruksen kroonisten kantajien lukumäärä saavuttaa 400 miljoonaa ihmistä. Noin 50 miljoonaa ihmistä saa HBV-tartunnan vuosittain, heistä noin 2 miljoonaa kuolee. Noin 500 miljoonaa ihmistä on saanut tartunnan hepatiitti C-viruksella (HCV). Siksi tällä hetkellä hepatiitti B: tä ja hepatiittia C aiheuttavien infektioiden epidemian tilanne on melko epäsuotuisa.

Tässä suhteessa on aiheellista käyttää näiden infektioiden diagnostiikkamenetelmiä, joiden tulisi täyttää seuraavat ominaisuudet:

- saadaan analyysitulokset mahdollisimman pian;

- korkea spesifisyys ja herkkyys edellytyksinä analyysin luotettavuudelle.

PCR ratkaisee seuraavat tehtävät:

- infektioiden diagnoosi taudin varhaisimmissa vaiheissa (seronegatiivisen ikkunan aikana);

- osoittaa virusten puuttuvan verestä entsyymimmuunimäärityksen epävarmoilla tuloksilla;

- paljastaa todelliset viruksen kantajat seropositiivisten henkilöiden joukossa;

- avulla voit määrittää hepatiitti C-virusten genotyypin (1a, 1b, 2,3a / 3b).

PCR antaa sinun määrittää testimateriaalissa (veri, maksan puhkeaminen) hepatiitti B -viruksen DNA: n tai hepatiitti C -viruksen RNA: n sekä kvalitatiivisesti että kvantitatiivisesti.

Positiivinen analyysi tarkoittaa akuuttia tai kroonista hepatiittia, negatiivinen tulos - ei tartuntaa.

viitteitä

  • AlAT: n ja AsAT: n veren pitoisuuden biokemiallisen analyysin lisääntyessä
  • Tutkimus raskauden tai leikkauksen valmisteluun
  • Tutkimukset potilaille, joille annetaan usein laskimonsisäinen injektio
  • Suojaamaton seksuaalinen kontakti
  • Riippuvuus
  • Virushepatiitin merkkejä esiintyessä
  • Sapen stagnaatio (kolestaasi)

Metodologia

Hepatiitin diagnoosissa käytetään reaaliaikaista PCR-menetelmää DT-96-analysaattorissa, DNA-teknologiayrityksen reagensseissa..

koulutus

Erityistä valmistelua analyysiin ei vaadita. On suositeltavaa olla syömättä 4 tuntia ennen verinäytteenottoa.

Tutkimus voidaan suorittaa 2 viikkoa arvioidun tartunta-ajan jälkeen, mikä mahdollistaa sairauden varhaisen diagnosoinnin.

Kiitos lääkärille leikkauksesta, makasin leikkauspöydällä helposti ja hänen tuellaan hieman humoristisesti ja nukahdin, se ei ollut pelottavaa, kiitos paljon tehdystä työstä. Lisätietoja

Kiitän syvää ihanaa lääkäriä Titov Dmitri Aleksejevitšia hoidosta, huomaavaisesta asenteesta ja ammattitaitoa! Kiitos positiivisesta asenteestasi koko hoidon ajan. Lisätietoja

Minua hoidettiin osastolla vuosina IX / 2019-II / 2020, haluan ilmaista syvän kiitokseni koko syöpälääkehoitoosaston ryhmälle ihanan, herkän lääkärin Shikina Valentina Evgenievnan ohjauksessa. Laitoksen luoman ilmapiirin ansiosta erittäin vaikea hoito siirrettiin moraalisesti helpoksi! Kiitos ammattitaidosta, ota huomioon. Lisätietoja

Kiitän vilpittömästi erittäin hyvää lääkäriä Pavel Jurjevitš Orekhovia. Niin tapahtui, että jouduin suorittamaan erilaisten diagnoosien hoitoon verisuonikirurgian osastolla ja Pavel Yurievich oli hoitava lääkäri. Olen varma, että suositellaan hänen ammattitoimintaa, tapaamisia. Lisätietoja

Mahtava lääkäri. Kiitos kaikesta kaikesta, erittäin osaavasta, huomaavaisesta ja se on nyt hyvin harvinaista lääketieteessämme. Hän pyrkii parantamaan potilasta ja auttamaan häntä eikä vain puhumaan. Mieheni ja minä olemme hänen potilaitaan ja olemme erittäin iloisia siitä, että kohtalo toi meidät yhteen niin upean lääkärin kanssa. Kiitos. Lisätietoja

Haluan ilmaista syvän kiitokseni Jevgeni Jurjevitš Khlopushinille hänen ammattitaidostaan ​​ja epätavallisen herkästä asenteestaan. Lääkäri lähestyi tilannetta erittäin osaavasti ja kokonaisvaltaisesti: hän teki täydellisen diagnoosin ja järjesti tarvittavan preoperatiivisen hoidon mahdollisimman lyhyessä ajassa. Hän suoritti loistavasti monimutkaisen operaation, jonka jälkeen pystyin melkein viikkoa myöhemmin. Lisätietoja

Suhtaudun syvästi kiitos onkologikirurgille, MD Ishchenko Roman Viktorovichille hänen sydämestään, korkeimmasta ammattitaidosta ja herkästä asenteesta potilaita kohtaan. Kiitän kohtaloa, että opimme tästä upeasta lääkäristä terveysohjelman kautta. Rooma Viktorovitš auttoi meitä selviytymään ongelmastamme. Operaatio, jonka hän teki mieheni kanssa helpoassa menneisyydessä. Lisätietoja

Paljon kiitoksia lääkäri-koloproktologille Zinovsky Mihail Vyacheslavovich. Hän oli vastaanotossaan 11. maaliskuuta 2020. Akuutti kipu, tuskin saavutettu miehensä kanssa, vaikkakin tien toisella puolella. Hän teki kaiken, minusta näyttää parhaalta. Hän antoi kaikki tarvittavat suositukset ja puhelinnumeron. Hän sanoi soittavan jos on kysyttävää. Soitin ja kuulin häntä. Lisätietoja

Päätin helmikuussa 2020 päästä onkologian osastoon, missä tapasin laitoksen päällikkö Kosy Valentina Vasilievna. Kiitos paljon hänen ammattitaidostaan ​​ja herkkyydestään. Täällä tehtiin monimutkaisin toimenpide Ischenko Roman Viktorovich ja Astakhov Dmitry Anatolyevich. Nämä ovat kolme pelastaja enkeliäni.
Nyt olen toipumassa nopeasti. Lisätietoja

Kiitän Arthur Robertovichia hänen ammattitaidostaan ​​ja "kultaisista" käsistään. Hän leimoi äitinsä kanssa kahdesti kesäkuussa 2019 ja helmikuussa 2020, ja molemmat kertaa menestyksekkäästi. Erittäin huomaavainen, herkkä ja reagoiva lääkäri. Erittäin siisti työssään ja että tyytyväinen "esteettiin" saumojen suhteen))) Hän kirjaimellisesti pelasti henkeni. Lue lisää

Hakeudu sairaalahoitoon tai tutkimukseen.
Vastaanottovirkailijat ottavat sinuun yhteyttä ja sopivat
sinulle sopiva aika. Tai siirry online-ilmoittautumislomakkeeseen.

Hepatiitti C-virus, RNA (HCV, PCR) -plasma, laatu.

Hepatiittiviruksen kanssa

Hepatiitti C-virus

Opintotiedot

Hepatiitti C on tarttuva maksasairaus, joka aiheuttaa HCV-viruksen. Hepatiitti C-virus lisääntyy verisoluissa ja tartuttaa maksasoluja. Virus leviää suojaamattoman sukupuolen kautta, kosketuksella vereen (esimerkiksi lääketieteellisissä toimenpiteissä, verensiirroissa, käyttämällä yhtä ruiskua jne.) Äidiltä lapselle raskauden tai synnytyksen aikana. Tutkimus paljastaa viruksen esiintymisen veressä 5-20 päivän kuluttua mahdollisesta tartunnasta.

Hepatiitti C: n (HCV) aiheuttajan havaitseminen tapahtuu reaaliaikaisella polymeraasiketjureaktiomenetelmällä. Viruksen geneettisen materiaalin (RNA) läsnäolo veressä määritetään.

Kaikista virushepatiitin aiheuttajista HCV: llä on eniten variaatioita, ja korkean mutatiivisen aktiivisuutensa vuoksi se kykenee välttämään ihmisen immuunijärjestelmän suojamekanismeja. Viruksella on 6 genotyyppiä ja monia alatyyppejä, joilla on erilaiset merkitykset taudin ennusteelle ja viruslääkityksen tehokkuudelle.
Hepatiitti C kulkeutuu veren ja kehon nesteiden läpi parenteraalisesti, seksuaalisesti ja transplacentraalisesti. Korkean riskin ryhmään kuuluvat ihmiset, jotka harjoittavat laskimonsisäistä huumeiden väärinkäyttöä, satunnaisia ​​yhdyntätoimia, sekä lääketieteen työntekijöitä, potilaita, jotka tarvitsevat hemodialyysiä tai verensiirtoa, vankeja. Tunkeutuen kehoon, HCV pääsee verin makrofageihin ja maksan hepatosyyteihin, missä sen replikaatio tapahtuu. Maksan vaurioituminen tapahtuu pääasiassa immuunien hajoamisen vuoksi, ja viruksella on myös suora sytopaattinen vaikutus. Virusantigeenin samankaltaisuus ihmisen histoyhteensopivuuden järjestelmän antigeenien kanssa aiheuttaa autoimmuunisten ("systeemisten") reaktioiden esiintymisen. HCV-infektion systeemisten ilmenemismuotojen ohjelmassa voi esiintyä autoimmuunista kilpirauhastulehdusta, Sjogrenin oireyhtymää, ideopaattista trombosytopeenista purppuraa, glomerulonefriittia, nivelreumaa jne. Muihin virushepatiittiin verrattuna hepatiitilla C on vähemmän elävä kliininen kuva, muuttuu useammin krooniseksi. 20 - 50%: n tapauksista krooninen hepatiitti C johtaa maksakirroosin kehittymiseen ja 1,25 - 2,50%: n - maksasolukarsinooman kehittymiseen. Autoimmuunikomplikaatioita esiintyy korkealla taajuudella.

Inkubointijakso on 5 - 20 päivää. Inkubointijakson lopussa maksan transaminaasien tasot nousevat, mahdollisesti maksa- ja pernan nousut. Akuutti ajanjakso etenee heikkouden, ruokahaluttomuuden kanssa. Kolmannessa tapauksista on kuume, nivelkipu, polymorfinen ihottuma. Dyspeptiset ilmiöt ja polyneuropaatiat ovat mahdollisia. Koletaasi on erittäin harvinainen..

Indikaatiot tutkimuksen tarkoitusta varten

Opintojen valmistelu

Tämän tutkimuksen avulla vuokra

  • 20.79. AT ja AH HIV 1/2: lle (seulonta, laatu)
  • 20.21. Hepatiitti B, HBs Ag (Qual)
  • 20.80. Sifilis-summa. AT (IgG ja IgM) (Qual)
  • 20,118. Hepatiitti A, anti-HAV-summa. AT (laskettu)
  • 3.9.1. Kliininen verikoe leukosyyttikaavalla ja ESR: llä (verimustauksen mikroskopialla, kun patologiset muutokset havaitaan) (laskimoveri)
  • 27,113. Biokemia 8 indikaattoria

Tutkimustulokset

Tutkimustuloksiin vaikuttavat tekijät

Tuloksen tulkinta

  • ”Löydetty”: analysoidusta biologisen materiaalin näytteestä löydettiin hepatiitti C -virukselle spesifistä RNA-fragmenttia, joka oli hepatiitti C-viruksen infektio..
  • ”Ei havaittu”: Hepatiitti C -virukselle spesifistä RNA-fragmenttia tai patogeenin RNA-pitoisuutta näytteessä, joka on alle testin herkkyysrajan, ei löytynyt tutkitusta biologisen materiaalin näytteestä.