Hepatiitti B: n PCR-tyypit ja tulosten tulkinta

Polymeraasiketjureaktio on eräänlainen verikoe, jolla voidaan tarkkaan havaita hepatiitti B-virus. Menetelmän ominaisuus on, että se pystyy osoittamaan HBV: n varhaisissa vaiheissa - jo kuukausi infektion jälkeen, kun taas potilaan spesifinen antigeeni havaitaan vasta 2 kuukauden kuluttua.. PCR voi havaita ei vain tavallisen DNA-viruksen, vaan myös mutanttikantojen, joita mikään muu analyysi ei näe.

Kun dekoodataan PCR hepatiitti B: lle, tuloksia verrataan standardiarvoihin. Tämän perusteella tehdään johtopäätöksiä taudin esiintymisestä (positiivinen tulos), viruksen pitoisuudesta (aktiivisuus) tai taudin puuttumisesta (negatiivinen tulos). Tietojen käsittely kestää 2 viikkoa.

PCR-tyypit virushepatiitti B: lle

Hepatiitti B: lle on määrätty 2 tyyppisiä diagnooseja. Korkealaatuinen PCR antaa mahdollisuuden sanoa 100-prosenttisella tarkkuudella, onko HBV: tä veressä vai ei. Kvantitatiivinen PCR osoittaa viruksen aktiivisuuden, ts. Kuinka monta HBV: n DNA-fragmenttia sisältyy 1 ml: aan verta.

Laadukas PCR ja sen tulkinta

Verikoe hepatiitti B: ltä PCR: llä voi havaita vain DNA-fragmenttien esiintymisen. Sitä määrätään, jos potilas epäilee HBV-tartuntaa (HBV) tai jos muut diagnoosimenetelmät, esimerkiksi serologiset testit, eivät anna selkeää vastausta. Tulosten dešifrointi laadullista analyysiä varten on hyvin yksinkertaista:

  • negatiivinen tulos - virusta ei ole;
  • positiivinen - virus havaittu.

Korkealaatuisen PCR: n tavoitteena on vahvistaa tai kieltää hepatiitti B -viruksen esiintyminen sekä suorittaa varhainen diagnoosi. Jos HBV havaitaan 1-2 viikon kuluessa tartunnasta, hoidosta tulee tehokkainta. Kun HBV kehittyy aktiivisesti vähintään 2 kuukautta, tauti muuttuu krooniseksi eikä sitä voida parantaa kokonaan.

Jos korkealaatuinen hepatiitin PCR osoittaa viruksen esiintymisen, seuraava askel on suorittaa kvantitatiivinen diagnoosi.

Kvantitatiivinen PCR

Tehokkaan hoidon määrääminen tai hoidon tulosten arvioiminen ei riitä, että tiedät vain, että potilaalla on HBV. On tarpeen määrittää hepatiitti B-virus-DNA: n arvo 1 ml: ssa verta, toisin sanoen viruskuormitus kehossa. Tämän tyyppinen PCR hepatiitti B: n suhteen suoritetaan seuraavissa tapauksissa:

  1. Ennen hoidon määräämistä.
  2. Hoidon tehokkuuden arviointi.
  3. Määrittää viruksen lääkeresistenssin kehitys.
  4. Taudin vaiheen määrittämiseksi.

Viruksen yksiköt ovat kansainvälisiä yksiköitä (IU / ml) tai DNA: n kopioiden lukumäärä / ml, ts. DNA-fragmenttien lukumäärä 1 ml: aa verta. Kahden yksikön välinen suhde riippuu valitusta testijärjestelmästä ja vaihtelee välillä 2 - 7 kopiota / ml 1 IU / ml. Jos järjestelmää ei tunneta, muuntamiseen käytetään keskiarvoa:

1 IU / ml = 5 kopiota / ml

Jos kvantitatiivinen analyysi tehdään heti, raja normi taudin diagnosoimiseksi on 75 IU / ml. Tämän indikaattorin yläpuolella olevalla tuloksella tehdään HBV-diagnoosi, alapuolella - HBV: tä ei havaita.

Kvantitatiivisen PCR: n tulkinta

Hepatiitti B: n kanssa seuraavat viruskuorman arvot (viremia), kopiot / ml, ilmestyvät PCR-normeina:

  • 10 ^ 5 kopiota / ml. Kun korkean virusaktiivisuuden avulla havaitaan ALAT-tason nousua enemmän kuin 2 kertaa kuuden kuukauden aikana, viruslääkitys määrätään välittömästi.

PCR-diagnostiikan tuloksia käytetään myös selvittämään, miten DNA-hepatiitti käyttäytyy kroonistamisen yhteydessä, ts. Siirtyessä krooniseen muotoon akuutista,:

  • HBV DNA 2 x 10 ^ 6 kopiota / ml tarkoittaa, että sairauden kroonisen muodon hankkiminen on väistämätöntä.

Tutkimuksen valmistelu

HBV: n esiintymisen määrittämiseksi PCR: llä suoritetaan verikoe laskimosta. Menettely suoritetaan aina tiukasti tyhjään vatsaan, ja on parasta mennä laboratorioon aamulla, kun luonnollinen lepoaika ruoasta on 8 tuntia. Jotta tutkimuksen tulokset olisivat oikein, sinun on tiedettävä etukäteen, kuinka valmistautua poliklinikkamatkalle oikein. Lisävaiheet ovat seuraavat:

  1. Rasvaisten ruokien, tupakoinnin, alkoholin ja urheilun epääminen 12 tuntia ennen toimenpidettä.
  2. Lepää 20 minuuttia heti ennen verenluovutusta.
  3. Ennen hoidon aloittamista on välttämätöntä varoittaa sairaanhoitajaa käytetyistä lääkkeistä.

Huomio! Jos diagnoosi suoritetaan alle 5-vuotiaille lapsille, puoli tuntia ennen toimenpidettä sinun täytyy juoda se keitetyssä vedessä yhdessä lasissa 10 minuutin välein..

Yhteenvetona

Nykyään PCR-diagnoosi hepatiitti B: n havaitsemiseksi on tarkin menetelmä. Menetelmän avulla voit nähdä taudin piilotetut ja mutatoituneet muodot, tunnistaa taudin ensimmäisinä viikkoina tartunnan jälkeen ja suorittaa vastaavasti tehokasta hoitoa. Tilanteesta riippuen suoritetaan kvalitatiivinen tai kvantitatiivinen PCR, jonka tarkoituksena on tunnistaa HBV ja määrittää sen aktiivisuus. Tutkittavaksi sinun on otettava yhteyttä virologiin, tartuntataudin asiantuntijaan tai hepatologiin.

PCR hepatiitti C: lle

PCR - moderni C-hepatiitin diagnoosi

Virushepatiitti C on yksi salaperäisimmistä maksasairauksista. Se on pitkään oireeton, mikä johtaa krooniseen prosessiin (80%: ssa). Useimmissa tapauksissa se päättyy maksafibroosiin, joka virtaa maksakirroosiin tai elimen kasvaimeen.

Erityisen tärkeitä ovat taudin varhaisen diagnosoinnin menetelmät. Polymeraasiketjureaktion (PCR) avulla voit diagnosoida muutaman päivän infektion jälkeen.

Lyhyesti virus C-hepatiitista

Patogeeni - RNA, joka sisältää viruksen, jolla on useita alatyyppejä. Se tunkeutuu ihmiskehoon veren kautta: seksuaalisesti, verensiirron, injektioiden ja muiden invasiivisten lääketieteellisten toimenpiteiden kautta.

Taudin akuutissa muodossa ei ole merkittäviä oireita. Joskus oikeassa hypochondriumssa on vakavuus, jota useimmat potilaat eivät huomaa.

Krooninen muoto johtaa kaikkien maksatoimintojen rikkomiseen: päihtyminen, vatsakipu, keltaisuus, nivelkipu ja monet muut. Tässä vaiheessa prosessista tulee peruuttamaton..

Usein kroonisesta hepatiitista C tulee maksakudoksen pahanlaatuisen rappeutumisen edeltäjä.

PCR-menetelmän ydin

PCR: llä viruksen RNA määritetään 5 päivää infektion jälkeen. Tänä aikana immuunivastetta ei ole vielä käynnistetty, serologisen testin tulokset ovat negatiiviset, kliiniset oireet puuttuvat kokonaan.

PCR-diagnostiikka antaa mahdollisuuden tehdä diagnoosi sairauden varhaisessa vaiheessa, kun riittävä hoito parantaa merkittävästi potilaan ennustetta. PCR-menetelmiä on kahta tyyppiä - kvalitatiivinen ja kvantitatiivinen.

Laadukas tekniikka

Tunnistaa C-hepatiitin viruksen geneettisen materiaalin minimaalisena määränä. Tulos on kahta tyyppiä:

  1. "Löydetty" - positiivinen reaktio, joka osoittaa sairauden esiintymisen ihmisissä.
  2. ”Ei havaittu” - negatiivinen analyysi, joka osoittaa tartunnan puuttumisen tai viruksen esiintymisen niin pieninä määrinä, joita tällä menetelmällä ei ole vahvistettu. Tämä ei anna 100% todennäköisyyttä siitä, että potilaalla ei ole virushepatiitti C: tä.

Analyysiin käytetään useimmiten verta, mutta sylki, siemenneste ja muut biologiset nesteet ovat myös sopivia..

PCR hepatiitti C: lle

Määrällinen tekniikka

Tämä on monimutkaisempi ja kalliin menetelmä, joka suoritetaan tiettyjen ohjeiden mukaan:

  1. Diagnoosin vahvistaminen positiivisella kvalitatiivisella PCR: llä ja spesifisten vasta-aineiden havaitseminen.
  2. Yhdistetyn viruspatologian tapauksessa (hepatiitti C-virus "vierekkäin" usein samoilla tavoilla leviävän hepatiitti B: n kanssa).
  3. Hoidon tehokkuuden seuranta. Voit tehdä tämän selvittääksesi viremian tason ennen hoitoa, sen jälkeen 4, 12, 24 hoitoviikolla. Jos virustaso ei laske 12 viikossa kahdella logaritmisella yksiköllä, lääke valitaan väärin.
  4. Diagnoosi siirtymästä akuutista krooniseen.

Virusyksiköiden lukumäärä lasketaan testinesteen tilavuusyksikköä kohti (yleensä 1 ml). Tulos ilmaistaan ​​IU / ml tai viruksen RNA: n kopiomäärinä 1 ml.

Se osoittaa viruskuorman voimakkuuden kehossa. Mitä korkeampi tämä arvo, sitä suurempi on todennäköisyys viruksen leviämisestä muille ihmisille. Maksan vaurioiden vakavuus ei riipu viremian tasosta. Tätä varten on olemassa lukuisia ns. Maksatutkimuksia..

Opintojen valmistelu

Useimmat väärin negatiiviset analyysit johtuvat analyysitekniikan noudattamatta jättämisestä. Tämän välttämiseksi on noudatettava seuraavia sääntöjä:

  1. Sulje pois epäpuhtaudet pääsystä biomateriaaliin (ehdoton steriiliysolosuhteet).
  2. Hepariinin vähimmäispitoisuus veressä, jota käytetään hyytymisen estämiseen tai jota määrätään potilaalle terapeuttisiin tarkoituksiin, vaikuttaa PCR-tulokseen. On tärkeää selventää tämä asia potilaan kanssa etukäteen..
  3. Estä ympäristöstä aineet, jotka neutraloivat entsyymejä PCR-testijärjestelmissä.

Kaikki nämä vaatimukset liittyvät laboratorioapulaisten ja lääkäreiden toimintaan. Potilaan ei tarvitse valmistautua erityisesti. Yleensä he luovuttavat verta tyhjään vatsaan, sulkevat pois alkoholin.

PCR: n edut

Hepatiitti C: n kattavassa tutkimuksessa polymeraasiketjureaktio on ensinnäkin monien etujen takia:

  1. Patogeenin suora eristäminen kyvyllä tunnistaa sen alatyyppi. Muissa tapauksissa (serologiset reaktiot) tutkitaan immuunijärjestelmän reaktio virukseen..
  2. Tekniikan korkea spesifisyys. Väärien positiivisten tai väärien negatiivisten tulosten saamisen todennäköisyys on minimoitu (lähinnä, kun tutkimuksen tekniikkaa rikotaan).
  3. Yliherkkyys. Useimpien laboratorioiden ja testijärjestelmien herkkyys on vähintään 50 IU / ml. On ultra-PCR, jossa tämä luku on 10 IU / ml. Tämä tarkoittaa, että hepatiitti C-virus voidaan havaita infektion varhaisina päivinä..
  4. Universaalisuus. PCR-menetelmällä useat hepatiitin patogeenit havaitaan heti, jos niitä on.

TÄRKEÄ! Virukset, joiden genotyyppi vaihtelee suuresti (hepatiitti C, influenssa) "sekoittaa" immuunijärjestelmän, mikä johtaa serologisten testien sumeaan indikaattoriin (spesifisten vasta-aineiden havaitsemiseen). Vain PCR antaa tarkan vastauksen patogeenin genotyypin esiintymisestä kehossa.

Tulosten tulkinta

Hepatiitti C: n PCR suoritetaan yleensä vasta-aineiden serologisten testien jälkeen. Potilaille vaikein on menetelmän kvantitatiivisen version tulkinta. Yritetään selvittää tämä..

Jos tulos esitetään IU / ml, tulokset kuvataan seuraavasti (tiedot koskevat venäläisiä laitteita ja testijärjestelmiä):

Virus-RNA: n määräTulkinta
Ei havaittuNormi ​​(jos muita kliinisiä tai laboratoriooireita ei ole) tai viruksen määrä alle tämän menetelmän herkkyysrajan
Alle 1,5 x 10 3Luku on "lineaarisen alueen alapuolella", mikä tarkoittaa patogeenin esiintymistä kehossa, mutta ilman mahdollisuutta kuvata viruskuormitusta määrällisesti
Alle 4 x 10 6Virus-RNA havaittu, viremia alhainen (ennuste on suotuisa)
Yli 4 x 10 6Virus-RNA havaittu, viremia korkea
Yli 2 x 10 8Pitoisuus on korkea, lineaarisen alueen yläpuolella, mikä tarkoittaa erittäin suurta viruskuormitusta, jota nykyaikaiset mittauslaitteet eivät kuvaa (epäsuotuisa ennuste).

Taulukko näyttää tulkintavaihtoehdon vain yhdelle venäläisten testijärjestelmien versioille. Jokainen laboratorio voi käyttää omia laitteitaan, jolloin arvoissa on ero. Yleensä tulos annetaan joko valmiilla dekoodauksilla tai osoittamalla normaaliarvojen rajat.

PCR: n tulkinnan piirteet

Hoidon aloittamisen ajankohta riippuu analyysitulosten oikeasta tulkinnasta, mikä on hepatiitti C: n tapauksessa potilaalle välttämätöntä.

On olemassa useita tekijöitä, jotka vaikuttavat analyysitulosten dekoodaukseen:

  • Laitteiden laatu ja testijärjestelmien herkkyys. Tähän päivään mennessä yleisin Cobas Ampicolor HCV-Test ja RealBest HCV RNA. Niiden herkkyys on vähintään 50 IU / ml. Tämä tarkoittaa, että jos virusta on pienemmässä konsentraatiossa (esimerkiksi tartunnan ensimmäisinä päivinä), tutkimuksen tulos on negatiivinen ja tauti etenee ilman hoitoa. Viime aikoina on ilmestynyt erittäin herkkiä diagnostiikkajärjestelmiä (vähintään 10 IU / ml). Ne parantavat merkittävästi diagnoosin laatua. Tällaisen PCR: n kustannukset vaihtelevat suuresti - 1800 - 10 tuhatta ruplaa laboratoriosta riippuen.
  • Lopullinen diagnoosi tehdään vasta kolmen erilaisen biologisen nesteen tutkimuksen jälkeen. Jos tulos on negatiivinen kolme kertaa, potilaan kehossa ei ole hepatiitti C-virusta.
  • Menestyksekkään hoidon kannalta on välttämätöntä paitsi vahvistaa virustartunnan tosiasia, myös määrittää sen alatyyppi: 1a, 1c, 2a, 2c, 2c, 3, 4, 5a, 6..
  • Tulokset arvioidaan kahdessa yksikössä: ME / ml ja RNA / ml kopiomäärä. Niiden lukumäärä eroaa tarkalleen 4 kertaa, mitä sinun on muistettava, kun saat analyysitulokset käsillä.

Asiantuntijoiden tulisi tulkita virushepatiitti C: n PCR-reaktiota. Lääkäri ymmärtää kvantitatiiviset indikaattorit ja osaa verrata laboratoriotulosten vastaavuutta kliiniseen kuvaan.

Joskus on vääriä positiivisia tai vääriä negatiivisia testivaihtoehtoja, ja vain kattava potilaan tutkimus antaa sinun "unohtaa" tämän vakavimman maksasairauden..

Hepatiitti B -viruksen tutkimukset (ELISA ja PCR)

Hepatiitti B -viruksen antigeeni "s" (HBsAg)

Seerumin hepatiitti B -pinta-antigeeni puuttuu normaalisti.
Seerumin hepatiitti B -pinta-antigeenin (HBsAg) havaitseminen varmistaa akuutin tai kroonisen hepatiitti B -viruksen tartunnan.

Akuutissa sairaudessa HBsAg havaitaan veren seerumissa inkubaatiojakson viimeisen 1-2 viikon ja kliinisen ajanjakson ensimmäisen 2-3 viikon aikana. HBsAg-verenkierto veressä voi olla rajoitettu useisiin päiviin, joten sinun on pyrittävä varhaiseen potilastutkimukseen. ELISA-menetelmä voi havaita HBsAg: n yli 90%: lla potilaista. Lähes viidellä prosentilla potilaista herkät tutkimusmenetelmät eivät havaitse HBsAg: tä, tällaisissa tapauksissa virushepatiitin B etiologia vahvistetaan anti-HBcAg JgM: n tai PCR: n läsnäololla..

HBsAg-pitoisuuksina seerumissa kaikissa hepatiitti B: n vakavuusmuodoissa taudin korkeudella on huomattava vaihteluväli, mutta siinä on tietty malli: akuutilla ajanjaksolla seerumin HBsAg-pitoisuuden ja sairauden vakavuuden välillä on käänteinen suhde..

Korkea HBsAg-pitoisuus havaitaan useammin sairauden lievissä ja kohtalaisissa muodoissa. Vakavissa ja pahanlaatuisissa muodoissa HBsAg-pitoisuus veressä on usein alhainen, ja 20%: lla potilaista, joilla on vakava muoto ja 30%: lla pahanlaatuinen antigeeni, veri-antigeeni ei ehkä ole lainkaan havaittu. HBsAg-vasta-aineiden esiintymistä potilailla, joilla on tämä tausta, pidetään epäsuotuisena diagnoosimerkkinä; se määritetään hepatiitti B: n pahanlaatuisissa muodoissa.

Hepatiitti B: n akuutissa kulussa HBsAg-pitoisuus veressä alenee vähitellen, kunnes tämä antigeeni katoaa kokonaan. HBsAg häviää useimmilla potilailla 3 kuukauden sisällä akuutin infektion alkamisesta.

HBsAg-pitoisuuden lasku yli 50% akuutin ajanjakson kolmannen viikon loppuun mennessä, yleensä, osoittaa tartuntaprosessin melkein valmistuneen. Tyypillisesti potilailla, joilla HBsAg-pitoisuus on korkea taudin korkeudella, se havaitaan veressä useita kuukausia.
Potilailla, joilla on alhainen pitoisuus, HBsAg katoaa paljon aikaisemmin (joskus useita päiviä taudin puhkeamisen jälkeen). Yleensä HBsAg: n havaitsemisjakso vaihtelee muutamasta päivästä 4-5 kuukauteen. HBsAg: n enimmäis havaitsemisjakso sujuvan akuutin hepatiitti B: n aikana on enintään 6 kuukautta taudin puhkeamisesta.

HBsAg voidaan todeta terveillä yksilöillä, yleensä ennalta ehkäisevissä tai satunnaistetuissa tutkimuksissa. Tällaisissa tapauksissa tutkitaan muita virushepatiitti B -merkkejä - anti HBcAg JgM, anti HBcAg JgG, anti HBeAg ja maksan toiminta.

Jos negatiivinen, toista HBsAg-testaus tarvitaan..
Jos yli 3 kuukauden toistuvat verikokeet paljastavat HBsAg: n, tätä potilasta pidetään kroonisen virushepatiitti B -potilaana.
HBsAg: n esiintyminen on melko yleinen esiintyminen. Maailmassa on yli 300 miljoonaa lentoliikenteen harjoittajaa ja maassamme noin 10 miljoonaa lentoliikenteen harjoittajaa.
HBsAg-verenkierron lopettaminen ja sen jälkeen serokonversio (anti-HB-yhdisteiden muodostuminen) osoittavat aina toipumista - kehon uudelleenorganisointia.

Verikokeita HBsAg: n esiintymiseksi käytetään seuraaviin tarkoituksiin:

akuutin B-hepatiitin diagnoosiksi:

  • itämisaika;
  • taudin akuutti ajanjakso;
  • toipumisen varhaisessa vaiheessa;

kroonisen virushepatiitin B diagnoosiin;

sairauksien osalta:

  • jatkuva krooninen hepatiitti;
  • maksakirroosi;

riskipotilaiden seulontaan ja tunnistamiseen:

  • potilaat, joilla on usein verensiirtoja;
  • potilaat, joilla on krooninen munuaisten vajaatoiminta;
  • potilaat, joilla on moninkertainen hemodialyysi;
  • potilaat, joilla on immuunipuutos, mukaan lukien aids.

Arviointi tutkimuksen tuloksista

Tutkimuksen tulokset ilmaistaan ​​laadullisesti - positiivisina tai negatiivisina. Negatiivinen testitulos osoittaa seerumin HBsAg: n puuttumisen. Positiivinen tulos - HBsAg: n havaitseminen osoittaa akuutin virushepatiitti B: n, kuten myös kroonisen virushepatiitin B inkubaation tai akuutin ajanjakson.

Vasta-aineet hepatiitti B-virus JgG: n ydinantigeenille (anti-HBcAg JgG)

Normaalia anti-HBcAg JgG: tä seerumissa ei ole.
Potilailla anti-HBcAg JgG ilmaantuu virushepatiitin B akuutissa vaiheessa ja jatkuu koko elämän ajan. Anti-HBcAg JgG - HBV: n johtava merkki.

Verikokeella anti-HBcAg JgG: n esiintymiseksi käytetään diagnoosimaan:

  • krooninen virushepatiitti B seerumin HBs-antigeenin läsnä ollessa;
  • siirretty hepatiitti B.
  • Arviointi tutkimuksen tuloksista

    Tutkimuksen tulos ilmaistaan ​​laadullisesti - positiivisena tai negatiivisena. Negatiivinen testitulos osoittaa seerumin anti-HBcAg JgG: n puuttumisen. Positiivinen tulos - anti-HBcAg JgG: n havaitseminen osoittaa akuutin infektion, toipumisen tai aiemmin levinneen virushepatiitin B.

    Hepatiitti B -viruksen antigeeni "e" (HBeAg)

    Normaali HBeAg-seerumi puuttuu.
    HBeAg: ta löytyy useimpien akuutissa virushepatiitissa B kärsivien potilaiden veriseerumista. Se katoaa yleensä verestä ennen HBs-antigeeniä. Korkea HBeAg-taso taudin ensimmäisinä viikkoina tai sen havaitseminen yli 8 viikon ajan antaa syyn epäillä kroonista infektiota.

    Tätä antigeeniä esiintyy usein virus etiologisessa kroonisessa aktiivisessa hepatiitissa. Erityisen mielenkiintoista HBeAg: n määrittämisessä on se, että sen havaitseminen luonnehtii infektioprosessin aktiivista replikatiivista vaihetta. Todettiin, että korkeat HBeAg-pitoisuudet vastaavat suurta DNA-polymeraasiaktiivisuutta ja karakterisoivat viruksen aktiivista replikaatiota.

    HBeAg: n esiintyminen veressä osoittaa sen korkean tarttuvuuden, ts. aktiivisen hepatiitti B -infektion läsnäolo potilaan kehossa, ja se havaitaan vain, jos HBs-antigeeni on läsnä veressä. Potilailla, joilla on krooninen aktiivinen hepatiitti, viruslääkkeitä käytetään vain, kun HBeAg havaitaan veressä. HBeAg - antigeeni - hepatiitti B -viruksen akuutin vaiheen ja replikaation markkeri.

    Verikokeella HBe-antigeenin esiintymiseksi käytetään diagnoosimaan:

  • virushepatiitin B inkubaatioaika;
  • virushepatiitin B prodromaalinen ajanjakso;
  • virushepatiitin B akuutti ajanjakso;
  • krooninen pysyvä virushepatiitti B.
  • Arviointi tutkimuksen tuloksista

    Tutkimuksen tulos ilmaistaan ​​laadullisesti - positiivisena tai negatiivisena. Negatiivinen testitulos osoittaa, ettei HBeAg: tä ole seerumissa. Positiivinen tulos - HBeAg: n havaitseminen osoittaa akuutin virushepatiitin B inkubaation tai akuutin ajanjakson tai viruksen jatkuvan replikaation ja potilaan tarttuvuuden.

    Vasta-aineet hepatiitti B -virusantigeenille e (anti-HBeAg)

    Anti-HBeAg-seerumista puuttuu normaalisti. Anti-HBeAg-vasta-aineiden esiintyminen osoittaa yleensä hepatiitti B -viruksen voimakasta eliminaatiota kehosta ja lievää potilaan infektiota.

    Nämä vasta-aineet ilmestyvät akuutissa jaksossa ja kestävät jopa 5 vuotta infektion jälkeen. Kroonisessa pysyvässä hepatiitissa anti-HBeAg: ta löytyy potilaan verestä yhdessä HBsAg: n kanssa. Serokonversio, ts. HBeAg-proteiinin siirtyminen anti-HBeAg-proteiiniin, kroonisen aktiivisen hepatiitin kanssa, on usein ennustettavasti suotuisa, mutta sama serokonversio maksan voimakkaan sirroottisen muutoksen kanssa ei paranna ennustetta.

    Verikokeita anti-HBeAg: n esiintymiseksi käytetään seuraavissa tapauksissa virushepatiitin B diagnoosissa:

  • sairauden alkuvaiheen määrittäminen;
  • akuutti infektion ajanjakso;
  • toipumisen varhaisessa vaiheessa;
  • toipilasaika;
  • myöhään toipuminen.
  • äskettäisen virushepatiitti B: n diagnoosi;
  • kroonisen pysyvän virushepatiitin B diagnoosi.
  • Arviointi tutkimuksen tuloksista

    Tutkimuksen tulos ilmaistaan ​​laadullisesti - positiivisena tai negatiivisena. Negatiivinen testitulos osoittaa, että HBeAg-vasta-aineita ei ole seerumissa. Positiivinen tulos on HBeAg-vasta-aineiden havaitseminen, mikä voi viitata akuutin virushepatiitti B: n alkuvaiheeseen, akuuttiin infektiokauteen, toipumisen varhaiseen vaiheeseen, toipumiseen, äskettäiseen virushepatiitti B: hen tai pysyvään virushepatiittiin B.

    Kronisen hepatiitti B: n esiintymiskriteerit ovat:

  • HBV-DNA: n havaitseminen tai säännöllinen havaitseminen veressä;
  • ALT / ASAT-aktiivisuuden jatkuva tai toistuva nousu veressä;
  • kroonisen hepatiitin morfologiset merkit maksan biopsian histologisessa tutkimuksessa.
  • Hepatiitti B -viruksen havaitseminen PCR: llä (kvalitatiivisesti)

    Veren hepatiitti B -virusta puuttuu normaalisti.
    Hepatiitti B -viruksen laadullinen määritys veren PCR-menetelmällä antaa sinulle mahdollisuuden vahvistaa viruksen esiintyminen potilaan kehossa ja vahvistaa siten taudin etiologian.

    Tämä tutkimus tarjoaa hyödyllistä tietoa akuutin virushepatiitti B: n diagnosoimiseksi taudin inkubaatiossa ja varhaisessa vaiheessa, jolloin tärkeimmät serologiset merkit potilaan veressä eivät ehkä ole. Seerumin virus-DNA havaitaan 50%: lla potilaista ilman HBeAg: tä. PCR-menetelmän analyyttinen herkkyys on vähintään 80 viruspartikkelia 5 μl: ssa, joka läpäisi näytteen DNA: n havaitsemisen, spesifisyys - 98%.

    Tämä menetelmä on tärkeä kroonisen HBV: n diagnosoinnissa ja seurannassa. Noin 5-10% maksakirroosista ja muista kroonisista maksasairauksista johtuu kroonisesta hepatiitti B-viruksen kulkeutumisesta. Tällaisten sairauksien aktiivisuuden markkereita ovat HBeAg- ja hepatiitti B-DNA: n esiintyminen veressä.

    PCR-menetelmä mahdollistaa hepatiitti B-virus-DNA: n määrityksen veressä sekä laadullisesti että kvantitatiivisesti. Tunnistettava fragmentti on molemmissa tapauksissa hepatiitti B -viruksen rakenneproteiinigeenin ainutlaatuinen DNA-sekvenssi.

    Hepatiitti B-virus-DNA: n havaitseminen biomateriaalissa PCR-menetelmällä on välttämätöntä:

  • serologisten tutkimusten epäilyttävien tulosten ratkaiseminen;
  • taudin akuutin vaiheen tunnistaminen verrattuna infektioon tai kontaktiin;
  • viruslääkityksen tehokkuuden seuranta.
  • Hepatiitti B -viruksen DNA: n katoaminen verestä on merkki hoidon tehokkuudesta

    Hepatiitti B -viruksen havaitseminen PCR: llä (kvantitatiivisesti)

    Tämä menetelmä tarjoaa tärkeitä tietoja taudin kehittymisen voimakkuudesta, hoidon tehokkuudesta ja aktiivisten lääkkeiden vastustuskyvyn kehittymisestä..
    Virushepatiitin diagnosoimiseksi PCR: llä veriseerumissa käytetään testijärjestelmiä, joiden herkkyys on 50 - 100 kopiota näytteessä, mikä mahdollistaa viruksen havaitsemisen pitoisuutena 5 x 10 ^ 3 - 10 ^ 4 kopiota / ml. Virushepatiitti B: n PCR on ehdottomasti tarpeen viruksen lisääntymisen arvioimiseksi.

    Seerumin virus-DNA havaitaan 50%: lla potilaista ilman HBeAg: tä. Materiaali hepatiitti B-virus-DNA: n havaitsemiseksi voi olla veriseerumi, lymfosyytit, hepatobioptaatit.

    • Arvio viremiasta on seuraava:
    • alle 2,10 ^ 5 kopiota / ml (alle 2,10 ^ 5 IU / ml) - matala viremia;
    • välillä 2,10 ^ 5 kopiota / ml (2,10 ^ 5 IU / ml) - 2,10 ^ 6 kopiota / ml (8,10 ^ 5 IU / ml) - keskimääräinen viremia;
    • yli 2,10 ^ 6 kopiota / ml - korkea viremia.

    Akuutin virushepatiitin B tuloksen ja HBV-DNA-pitoisuuden välillä on yhteys potilaan veressä. Matalalla viremiatasolla kroonisen infektion prosessi on lähellä nollaa, keskimäärin - prosessin kroonisuus havaitaan 25-30%: lla potilaista, ja korkealla viremiatasolla akuutti virushepatiitti B muuttuu useimmiten krooniseksi.

    Kroonisen HBV-hoidon indikaatioilla interferoni-alfa: lla tulisi harkita aktiivisen viruksen replikaation markkereiden esiintymistä (HBsAg-, HBeAg- ja HBV-DNA: n havaitseminen seerumissa viimeisen 6 kuukauden aikana)..

    Kriteerit hoidon tehokkuuden arvioimiseksi ovat HBeAg- ja HBV-DNA: n häviäminen veressä, johon yleensä liittyy transaminaasien normalisoituminen ja taudin pitkäaikainen remissio. HBV-DNA häviää verestä 5. hoitokuukaudeksi 60%, yhdeksänneksi kuukaudeksi - 80%: iin potilaista. Viremia-tason lasku vähintään 85% kolmantena päivänä hoidon aloittamisesta verrattuna alkuperäiseen on nopea ja melko tarkka kriteeri hoidon tehokkuuden ennustamiseksi..

    Hepatiitti C: n PCR-analyysi

    Hepatiitti C on vakava sairaus, joka tuhoaa maksan. Se voi johtaa maksakirroosiin. Taudin puhkeamisen ja vasta-aineiden tuotannon alkamisen välillä voi kulua jopa kuusi kuukautta, joten on mahdotonta diagnosoida tautia entsyymisidonnaisella immunosorbenttimäärityksellä. Taudin oikea-aikainen analyysi ja hoidon aloittaminen auttavat hepatiitti C: n PCR-analyysiä.

    Indikaatiot tutkimukselle

    Kun sinun on läpäistävä analyysi:

    • jos entsyymin immunomääritys antoi positiivisen tuloksen;
    • potilaalla on maksakirroosin tai maksavaurion oireita: sen koko muuttuu, perna kasvaa, vatsassa on laajentuneita suonia, iho muuttuu keltaiseksi, vatsan oikealla puolella havaitaan kipuja;
    • ALT: n ja ASAT: n aktiivisuus verikokeessa lisääntyy;
    • ennen hoidon aloittamista viruksen määrän määrittämiseksi tartunnan saaneen henkilön veressä;
    • nähdäksesi kuinka tehokas terapia on ollut. Hoidon jälkeen - seurata terveydentilaa ja välttää uusiutumista;
    • jos hepatiitti B diagnosoidaan sekalaisten maksavaurioiden sulkemiseksi pois;
    • yhdynnän jälkeen hepatiitti-tartunnan saaneen henkilön kanssa.

    Kyselyn tavoitteet

    PCR: n (tai polymeraasiketjureaktion) tarkoituksena on tutkia veren koostumusta ja havaita flavivirus (hepatiitti C). Tämän analyysin merkittävä etu on, että se tunnistaa viruksen siinä vaiheessa, kun se ei ole vielä alkanut peruuttamattomien reaktioiden prosessia. PCR antaa sinun nähdä, kuinka pahasti elimistöön vaikuttaa, osoittaa laadulliset ominaisuudet ja määrittää viruksen genotyypin. Tämän avulla voit määrätä sopivimman hoidon kullekin erityistapaukselle..

    Monipuoliset analyysit

    PCR hepatiitti C: n havaitsemiseksi sisältää useita tutkimuksia:

    • laadullinen analyysi;
    • kvantitatiivinen analyysi;
    • genotyypitys.

    Laadullinen analyysi

    PCR: ää kutsutaan myös kvalitatiiviseksi analyysiksi. Jos se osoittaa negatiivisen tuloksen, virusta ei voida tunnistaa kehossa, koska sen pitoisuus on pienempi kuin laite pystyy tarttumaan. Tällaisessa tilanteessa on välttämätöntä määrittää, kuinka herkkä reagenssi on, jotta voidaan säätää lisäliuos..

    Analyysi voi osoittaa positiivisen tuloksen noin viidessä päivässä ihmisen tartunnan jälkeen.

    Kvantitatiivinen analyysi

    Tämäntyyppinen analyysitutkimus osoittaa viruskuormituksen tason, ts. Flaviviruksen pitoisuuden kehossa - kuinka monta viruksen fragmenttia on 1 kuutiometriä kohti potilaan verta.

    Tämän tyyppinen PCR-analyysi määrätään potilaalle ennen viruslääkityksen aloittamista tai kolmen kuukauden hoidon jälkeen nähdäkseen, kuinka tehokas määrätty kurssi on..

    Tämäntyyppinen analyysi osoittaa:

    • kuinka suuri on toisen henkilön tartunnan vaara, tämä todennäköisyys on suoraan verrannollinen viruskuormituksen indikaatioihin;
    • mikä hoito sopii tässä tapauksessa ja kuinka hedelmällinen se on;
    • hoidon kesto - mitä korkeampi virusten konsentraatio, sitä pidempi hoito on.

    Potilaan tulee tietää, että taudin vakavuus ei välttämättä riipu viruskuorman tasosta. Joskus maksa jopa vaurioituu vain hieman, vaikka potilaan veressä on runsaasti viruksia. Kuitenkin, jos raskaana olevalla naisella on korkea viruskuormitus, se todennäköisesti välittää taudin lapselleen.

    Uskotaan, että RNA-viruksen pitoisuuden alempi normi on 600 000 IU / ml, keskimäärin 600 000 - 700 000, korkea on 800 000 ja korkeampi.

    genotyypitys

    Koska tämä virus on herkkä suurille mutaatioille, on erittäin tärkeää määrittää, mikä genotyyppi on ihmisen veressä tutkimuksen aikana. Hepatiitti C: tä on kaikkiaan 11 genotyyppiä ja monia niiden alalajeista. Mutta Venäjällä vain kolme on yleistä: 1, 2 ja 3.

    Genotyypin määrittäminen mahdollistaa viruksen resistenssin määrittämisen. Hoitomenetelmä riippuu siitä..

    Kaikki hepatiitti C -genotyypit reagoivat hoitoon eri tavalla. 1 genotyyppiä hoidetaan vähintään vuoden ajan, ja mahdollisuus toipumiseen on noin 60%. Genotyyppejä 2 ja 3 hoidetaan kuuden kuukauden ajan, ja todennäköisyys päästä eroon taudista on noin 85%.

    Lisäksi genotyypin määrittäminen antaa mahdollisuuden nähdä, missä tilassa potilaan maksa on. Esimerkiksi rasvan kertyminen maksaan osoittaa, että potilas kärsii viruksen 3 genotyypistä.

    Tässä vaiheessa suoritettu verikoe näyttää genotyypille luonteenomaisen luvun. Toisinaan genotyyppiä ei ole mahdollista määrittää, ja laboratoriossa saadut vastaukset ilmaisevat ”ei kirjoitettu”. Tämä tarkoittaa, että henkilö kärsii genotyypistä, joka ei ole yleinen tällä maantieteellisellä alueella. Tunnistaaksesi se, sinun on läpäistävä analyysi uudelleen, mutta diagnoosijärjestelmällä, joka tunnistaa sen.

    Salauksen purkuprosessi

    Laboratoriosta saaduissa hepatiitti C: n PCR-analyyseissä tietyt tiedot ilmoitetaan yleensä, ja voit jopa purkaa ne itse:

    • havaittu / ei havaittu (laadullinen analyysi);
    • virusten lukumäärä (kvantitatiivinen analyysi);
    • genotyypin numero;
    • testin nimi.

    Uskotaan, että eniten huomiota tulisi kiinnittää toiseen kohtaan, koska näiden indikaattorien perusteella voit tehdä ennusteen, määrittää hoidon keston ja tyypin.

    Huolimatta analyysin selkeydestä, et voi itsenäisesti diagnosoida ja itsehoitaa, analyysin tulokset on osoitettava hoitavalle lääkärille.

    Kuinka valmistautua analyysiin

    Luotettavan tuloksen saamiseksi on tärkeää noudattaa useita sääntöjä:

    1. Testit kannattaa ottaa aamulla tyhjään vatsaan (yritä syödä viimeistä kertaa vähintään 8 tuntia ennen toimenpidettä).
    2. Älä juo mitään muuta kuin vettä ennen kuin luovutat verta.
    3. Kaksi päivää rasvaisten ja paistettujen ruokien sekä alkoholin poistamiseksi.
    4. Ainakin tunti on parempi luopua savukkeista.
    5. Testien tekemistä hieronnan, ultraäänitiedon tai röntgenkuvauksen jälkeen ei suositella.
    6. Päivää ennen tutkimusta potilaan tulee luopua lääkityksestä, fyysisestä aktiivisuudesta ja tunne stressistä.
    7. Puoli tuntia ennen tutkimusta tulisi olla rauhallinen ja rento..

    PCR-tutkimuksen nopeuteen vaikuttaa se, minkä tyyppisestä viruksesta potilas kärsii ja millä menetelmällä verikoe suoritetaan. Monimutkaisuudesta riippuen potilas voi saada testitulokset muutamassa tunnissa tai useissa päivissä. Mutta yleensä se ei vie yli 7 päivää.

    PCR-testin hintaan vaikuttaa klinikan tila, mihin potilas menee ja kuinka vaikeaa analyysi on. Hinta vaihtelee 400 ruplasta 11 tuhanteen.

    Potilaan on tärkeää tietää, että on olemassa negatiivisia vääriä testejä. Näin voi käydä, jos analysoitava veri on tehty väärin, sääntöjen vastaisesti tai kuljetettu sopimattomasti (esimerkiksi hänet vietiin laboratorioon yli kahden tunnin kuluttua keräämisestä). Tällaisessa tilanteessa potilaalla on riski saada virheellinen käsitys terveydentilastaan ​​ja menettää arvokasta aikaa.

    Siksi on erittäin tärkeää valita sopivin klinikka, joka välittää maineestaan ​​ja jolla ei ole varaa laiminlyödä potilaita. Ennen päätöksentekoa on syytä lukea arvosteluja laitoksesta ja sen henkilöstöstä. Valinta on parempi pysähtyä arvostettuun ja tunnettuun klinikkaan - virheen todennäköisyys on tässä tapauksessa pieni.

    Hepatiitin PCR-diagnoosi

    Hepatiitin PCR-diagnostiikan hinnat

    • Hepatiitti C -viruksen genotyypin (HepAtitis C virus) määrittäminen 1660 hiero.
    • Hepatiitti B -viruksen (HepAtitis B -viruksen) DNA: n määrittäminen veressä PCR: llä, laadullinen tutkimus, 520 ruplaa.
    • Hepatiitti B -viruksen (HepAtitis B -viruksen) DNA: n määrittäminen veressä PCR-menetelmällä, kvantitatiivinen tutkimus 1560 hieroa.
    • Hepatiitti C -viruksen RNA: n (HepAtitis C-virus) määrittäminen veressä PCR-menetelmällä, laadullinen tutkimus 570 hieroa.
    • Hepatiitti C -viruksen RNA: n (HepAtitis C-virus) määrittäminen veressä PCR-menetelmällä, kvantitatiivinen tutkimus 2600 hieronta.

    Polymeraasiketjureaktio (PCR) on yksi diagnostiikkamenetelmistä, jolla voidaan saavuttaa merkittävä kasvu tiettyjen nukleiinihappofragmenttien (DNA / RNA) pienissä pitoisuuksissa biologisessa materiaalissa (näytteessä) käyttämällä DNA-polymeraasientsyymiä.

    Maailman terveysjärjestön mukaan yli 2 miljardia ihmistä on saanut tartunnan hepatiitti B-viruksella (HBV); viruksen kroonisten kantajien lukumäärä saavuttaa 400 miljoonaa ihmistä. Noin 50 miljoonaa ihmistä saa HBV-tartunnan vuosittain, heistä noin 2 miljoonaa kuolee. Noin 500 miljoonaa ihmistä on saanut tartunnan hepatiitti C-viruksella (HCV). Siksi tällä hetkellä hepatiitti B: tä ja hepatiittia C aiheuttavien infektioiden epidemian tilanne on melko epäsuotuisa.

    Tässä suhteessa on aiheellista käyttää näiden infektioiden diagnostiikkamenetelmiä, joiden tulisi täyttää seuraavat ominaisuudet:

    - saadaan analyysitulokset mahdollisimman pian;

    - korkea spesifisyys ja herkkyys edellytyksinä analyysin luotettavuudelle.

    PCR ratkaisee seuraavat tehtävät:

    - infektioiden diagnoosi taudin varhaisimmissa vaiheissa (seronegatiivisen ikkunan aikana);

    - osoittaa virusten puuttuvan verestä entsyymimmuunimäärityksen epävarmoilla tuloksilla;

    - paljastaa todelliset viruksen kantajat seropositiivisten henkilöiden joukossa;

    - avulla voit määrittää hepatiitti C-virusten genotyypin (1a, 1b, 2,3a / 3b).

    PCR antaa sinun määrittää testimateriaalissa (veri, maksan puhkeaminen) hepatiitti B -viruksen DNA: n tai hepatiitti C -viruksen RNA: n sekä kvalitatiivisesti että kvantitatiivisesti.

    Positiivinen analyysi tarkoittaa akuuttia tai kroonista hepatiittia, negatiivinen tulos - ei tartuntaa.

    viitteitä

    • AlAT: n ja AsAT: n veren pitoisuuden biokemiallisen analyysin lisääntyessä
    • Tutkimus raskauden tai leikkauksen valmisteluun
    • Tutkimukset potilaille, joille annetaan usein laskimonsisäinen injektio
    • Suojaamaton seksuaalinen kontakti
    • Riippuvuus
    • Virushepatiitin merkkejä esiintyessä
    • Sapen stagnaatio (kolestaasi)

    Metodologia

    Hepatiitin diagnoosissa käytetään reaaliaikaista PCR-menetelmää DT-96-analysaattorissa, DNA-teknologiayrityksen reagensseissa..

    koulutus

    Erityistä valmistelua analyysiin ei vaadita. On suositeltavaa olla syömättä 4 tuntia ennen verinäytteenottoa.

    Tutkimus voidaan suorittaa 2 viikkoa arvioidun tartunta-ajan jälkeen, mikä mahdollistaa sairauden varhaisen diagnosoinnin.

    Kiitos lääkärille leikkauksesta, makasin leikkauspöydällä helposti ja hänen tuellaan hieman humoristisesti ja nukahdin, se ei ollut pelottavaa, kiitos paljon tehdystä työstä. Lisätietoja

    Kiitän syvää ihanaa lääkäriä Titov Dmitri Aleksejevitšia hoidosta, huomaavaisesta asenteesta ja ammattitaitoa! Kiitos positiivisesta asenteestasi koko hoidon ajan. Lisätietoja

    Minua hoidettiin osastolla vuosina IX / 2019-II / 2020, haluan ilmaista syvän kiitokseni koko syöpälääkehoitoosaston ryhmälle ihanan, herkän lääkärin Shikina Valentina Evgenievnan ohjauksessa. Laitoksen luoman ilmapiirin ansiosta erittäin vaikea hoito siirrettiin moraalisesti helpoksi! Kiitos ammattitaidosta, ota huomioon. Lisätietoja

    Kiitän vilpittömästi erittäin hyvää lääkäriä Pavel Jurjevitš Orekhovia. Niin tapahtui, että jouduin suorittamaan erilaisten diagnoosien hoitoon verisuonikirurgian osastolla ja Pavel Yurievich oli hoitava lääkäri. Olen varma, että suositellaan hänen ammattitoimintaa, tapaamisia. Lisätietoja

    Mahtava lääkäri. Kiitos kaikesta kaikesta, erittäin osaavasta, huomaavaisesta ja se on nyt hyvin harvinaista lääketieteessämme. Hän pyrkii parantamaan potilasta ja auttamaan häntä eikä vain puhumaan. Mieheni ja minä olemme hänen potilaitaan ja olemme erittäin iloisia siitä, että kohtalo toi meidät yhteen niin upean lääkärin kanssa. Kiitos. Lisätietoja

    Haluan ilmaista syvän kiitokseni Jevgeni Jurjevitš Khlopushinille hänen ammattitaidostaan ​​ja epätavallisen herkästä asenteestaan. Lääkäri lähestyi tilannetta erittäin osaavasti ja kokonaisvaltaisesti: hän teki täydellisen diagnoosin ja järjesti tarvittavan preoperatiivisen hoidon mahdollisimman lyhyessä ajassa. Hän suoritti loistavasti monimutkaisen operaation, jonka jälkeen pystyin melkein viikkoa myöhemmin. Lisätietoja

    Suhtaudun syvästi kiitos onkologikirurgille, MD Ishchenko Roman Viktorovichille hänen sydämestään, korkeimmasta ammattitaidosta ja herkästä asenteesta potilaita kohtaan. Kiitän kohtaloa, että opimme tästä upeasta lääkäristä terveysohjelman kautta. Rooma Viktorovitš auttoi meitä selviytymään ongelmastamme. Operaatio, jonka hän teki mieheni kanssa helpoassa menneisyydessä. Lisätietoja

    Paljon kiitoksia lääkäri-koloproktologille Zinovsky Mihail Vyacheslavovich. Hän oli vastaanotossaan 11. maaliskuuta 2020. Akuutti kipu, tuskin saavutettu miehensä kanssa, vaikkakin tien toisella puolella. Hän teki kaiken, minusta näyttää parhaalta. Hän antoi kaikki tarvittavat suositukset ja puhelinnumeron. Hän sanoi soittavan jos on kysyttävää. Soitin ja kuulin häntä. Lisätietoja

    Päätin helmikuussa 2020 päästä onkologian osastoon, missä tapasin laitoksen päällikkö Kosy Valentina Vasilievna. Kiitos paljon hänen ammattitaidostaan ​​ja herkkyydestään. Täällä tehtiin monimutkaisin toimenpide Ischenko Roman Viktorovich ja Astakhov Dmitry Anatolyevich. Nämä ovat kolme pelastaja enkeliäni.
    Nyt olen toipumassa nopeasti. Lisätietoja

    Kiitän Arthur Robertovichia hänen ammattitaidostaan ​​ja "kultaisista" käsistään. Hän leimoi äitinsä kanssa kahdesti kesäkuussa 2019 ja helmikuussa 2020, ja molemmat kertaa menestyksekkäästi. Erittäin huomaavainen, herkkä ja reagoiva lääkäri. Erittäin siisti työssään ja että tyytyväinen "esteettiin" saumojen suhteen))) Hän kirjaimellisesti pelasti henkeni. Lue lisää

    Hakeudu sairaalahoitoon tai tutkimukseen.
    Vastaanottovirkailijat ottavat sinuun yhteyttä ja sopivat
    sinulle sopiva aika. Tai siirry online-ilmoittautumislomakkeeseen.

    Hepatiitti C-virus, RNA-määritys. (HCV-RNA, laadullinen) veren seerumissa

    Hepatiitti C -viruksen RNA: n (HCV) määrittäminen veren seerumissa polymeraasiketjureaktion (PCR) avulla reaaliaikaisella havainnoinnilla.

    Tunnistettu fragmentti on hepatiitti C -viruksen RNA: n spesifinen kohta. Tunnistetut genotyypit: la, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6 alatyypistä riippumatta. Määrityksen spesifisyys on 100%. Määrityksen herkkyys - 60 IU / ml.

    • Hepatiitin kliiniset merkit.
    • Ennaltaehkäisevät seulonntatutkimukset (hepatiitti C -viruksen RNA on aikaisin akuutin infektion markkeri).
    • Ota yhteyttä kyselyihin.
    • Seka etiologian hepatiitin diagnoosi - johtavan viruksen tunnistaminen.
    • Viruksen aktiivisen replikaation vaiheen tunnistaminen kroonisessa tilassa.
    • Hoidon tehokkuuden seuranta.
    • Maksakirroosi.

    Tutkimustulosten tulkinta sisältää tietoa hoitavalle lääkärille, eikä se ole diagnoosi. Tämän osan tietoja ei voida käyttää itsediagnoosiin ja itsehoitoon. Lääkäri tekee tarkan diagnoosin käyttämällä sekä tämän tutkimuksen tuloksia että tarvittavia tietoja muista lähteistä: historiaa, muiden tutkimusten tuloksia jne..

    Hepatiitti C-virus, RNA (HCV, PCR) -plasma, laatu.

    Hepatiittiviruksen kanssa

    Hepatiitti C-virus

    Opintotiedot

    Hepatiitti C on tarttuva maksasairaus, joka aiheuttaa HCV-viruksen. Hepatiitti C-virus lisääntyy verisoluissa ja tartuttaa maksasoluja. Virus leviää suojaamattoman sukupuolen kautta, kosketuksella vereen (esimerkiksi lääketieteellisissä toimenpiteissä, verensiirroissa, käyttämällä yhtä ruiskua jne.) Äidiltä lapselle raskauden tai synnytyksen aikana. Tutkimus paljastaa viruksen esiintymisen veressä 5-20 päivän kuluttua mahdollisesta tartunnasta.

    Hepatiitti C: n (HCV) aiheuttajan havaitseminen tapahtuu reaaliaikaisella polymeraasiketjureaktiomenetelmällä. Viruksen geneettisen materiaalin (RNA) läsnäolo veressä määritetään.

    Kaikista virushepatiitin aiheuttajista HCV: llä on eniten variaatioita, ja korkean mutatiivisen aktiivisuutensa vuoksi se kykenee välttämään ihmisen immuunijärjestelmän suojamekanismeja. Viruksella on 6 genotyyppiä ja monia alatyyppejä, joilla on erilaiset merkitykset taudin ennusteelle ja viruslääkityksen tehokkuudelle.
    Hepatiitti C kulkeutuu veren ja kehon nesteiden läpi parenteraalisesti, seksuaalisesti ja transplacentraalisesti. Korkean riskin ryhmään kuuluvat ihmiset, jotka harjoittavat laskimonsisäistä huumeiden väärinkäyttöä, satunnaisia ​​yhdyntätoimia, sekä lääketieteen työntekijöitä, potilaita, jotka tarvitsevat hemodialyysiä tai verensiirtoa, vankeja. Tunkeutuen kehoon, HCV pääsee verin makrofageihin ja maksan hepatosyyteihin, missä sen replikaatio tapahtuu. Maksan vaurioituminen tapahtuu pääasiassa immuunien hajoamisen vuoksi, ja viruksella on myös suora sytopaattinen vaikutus. Virusantigeenin samankaltaisuus ihmisen histoyhteensopivuuden järjestelmän antigeenien kanssa aiheuttaa autoimmuunisten ("systeemisten") reaktioiden esiintymisen. HCV-infektion systeemisten ilmenemismuotojen ohjelmassa voi esiintyä autoimmuunista kilpirauhastulehdusta, Sjogrenin oireyhtymää, ideopaattista trombosytopeenista purppuraa, glomerulonefriittia, nivelreumaa jne. Muihin virushepatiittiin verrattuna hepatiitilla C on vähemmän elävä kliininen kuva, muuttuu useammin krooniseksi. 20 - 50%: n tapauksista krooninen hepatiitti C johtaa maksakirroosin kehittymiseen ja 1,25 - 2,50%: n - maksasolukarsinooman kehittymiseen. Autoimmuunikomplikaatioita esiintyy korkealla taajuudella.

    Inkubointijakso on 5 - 20 päivää. Inkubointijakson lopussa maksan transaminaasien tasot nousevat, mahdollisesti maksa- ja pernan nousut. Akuutti ajanjakso etenee heikkouden, ruokahaluttomuuden kanssa. Kolmannessa tapauksista on kuume, nivelkipu, polymorfinen ihottuma. Dyspeptiset ilmiöt ja polyneuropaatiat ovat mahdollisia. Koletaasi on erittäin harvinainen..

    Indikaatiot tutkimuksen tarkoitusta varten

    Opintojen valmistelu

    Tämän tutkimuksen avulla vuokra

    • 20.79. AT ja AH HIV 1/2: lle (seulonta, laatu)
    • 20.21. Hepatiitti B, HBs Ag (Qual)
    • 20.80. Sifilis-summa. AT (IgG ja IgM) (Qual)
    • 20,118. Hepatiitti A, anti-HAV-summa. AT (laskettu)
    • 3.9.1. Kliininen verikoe leukosyyttikaavalla ja ESR: llä (verimustauksen mikroskopialla, kun patologiset muutokset havaitaan) (laskimoveri)
    • 27,113. Biokemia 8 indikaattoria

    Tutkimustulokset

    Tutkimustuloksiin vaikuttavat tekijät

    Tuloksen tulkinta

    • ”Löydetty”: analysoidusta biologisen materiaalin näytteestä löydettiin hepatiitti C -virukselle spesifistä RNA-fragmenttia, joka oli hepatiitti C-viruksen infektio..
    • ”Ei havaittu”: Hepatiitti C -virukselle spesifistä RNA-fragmenttia tai patogeenin RNA-pitoisuutta näytteessä, joka on alle testin herkkyysrajan, ei löytynyt tutkitusta biologisen materiaalin näytteestä.

    PCR hepatiitti C: lle

    PCR (tai polymeraasiketjureaktio) on laboratoriomenetelmä patogeenin DNA: n ja RNA: n diagnosoimiseksi, jonka on ottanut käyttöön Carey Mullis (USA). Vain yksi ihosta tai kehon nesteestä löytyvä molekyyli riittää erittäin herkälle PCR-analyysille patogeeniviruksen tunnistamiseksi.

    PCR-tyypit

    Veressä on kolmen tyyppisiä PCR-analyysejä kroonisen hepatiitti C -viruksen suhteen - kvalitatiivinen, kvantitatiivinen ja analyysi, jotka määrittävät viruksen genotyypin.

    Hepatiitti C: n laadullinen PCR-analyysi suoritetaan niille potilaille, joiden ELISA-analyysi paljasti HVGS-vasta-aineita. Laadullisen PCR-analyysin tulos osoitetaan sanoilla ”RNA havaittu” tai “RNA: ta ei havaittu”. Testijärjestelmät, joiden herkkyys on vähintään 50 IU / ml, voivat havaita patogeenin vähimmäismäärän veressä. Alemmassa viruksen pitoisuudessa analyysi voi antaa väärän negatiivisen tuloksen. Virheiden välttämiseksi PCR-diagnostiikkaan erikoistuneet laboratoriot on varustettava erittäin herkillä testijärjestelmillä. Esimerkiksi Invitro-laboratorio käyttää testijärjestelmiä, joiden herkkyys on 15 IU / ml. Potilailla ja lääkäreillä on oikeus pyytää testiherkkyystietoja laboratorion henkilökunnalta.

    Hepatiitti C: n kvantitatiivinen PCR-analyysi tarvitaan viruksen pitoisuuden määrittämiseksi veressä (tai viremian aste). Tulokset puhuvat numerot. Jos 1 ml: ssa verta löytyy 2 miljoonaa IU, niin tulos on seuraava - 2 x 10 * 6 IU / ml. Jotkut laboratoriot käyttävät erilaista indikaattoria - kopioiden lukumäärä 1 ml: aa verta (1 IU on 4 kopiota RNA: ta). Osoittautuu, että 2 × 10 * 6 IU / ml vastaa 8 × 10 * 6 kopiota virus-RNA: ta (8 miljoonaa kopiota) 1 ml: ssa verta.

    Genotyyppien määritys määrää, mihin kuudesta genotyypistä virus kuuluu. Patogeenin genotyyppi vaikuttaa kliiniseen kuvaan, komplikaatioiden määrään ja potilaan lisäennusteeseen. Viruksen genotyypin oikea määrittäminen mahdollistaa lääkkeiden yhdistelmän valinnan ja hoidon keston määrittämisen.

    Indikaatiot analyysille

    HCV: n esiintymisen varmistamiseksi määrätään PCR-analyysi patogeenin havaitsemiseksi ja hoidon aloittamiseksi. Nimitykset:

    • Potilaalla on merkkejä maksatulehduksesta.
    • Ennaltaehkäisevien tutkimusten seulonta.
    • On tarpeen tutkia ihmisiä, jotka ovat kosketuksissa hepatiittipotilaiden kanssa.
    • Sekaperäisen hepatiitti diagnosoidaan, ja tärkein aiheuttaja on määritettävä.
    • Patogeenin lisääntymisaktiivisuuden taso määritetään kroonisilla potilailla..
    • Potilaalla on diagnosoitu maksakirroosi.
    • Hoidon tehokkuutta on tarpeen arvioida.

    Valmistelu hepatiitin PCR-diagnoosiin

    Menettely suoritetaan aamulla tyhjään vatsaan, veri otetaan laskimosta..

    Potilaan on noudatettava seuraavia sääntöjä:

    • Älä syö ruokaa 10 tuntia ennen toimenpidettä. Vain puhdas vesi on sallittua..
    • Älä tupakoi 4 tuntia ennen käsittelyä ja älä juo alkoholia päivää ennen analyysiä.
    • Vältä fyysistä ja psykologista stressiä ennen toimenpidettä.
    • Älä ota lääkkeitä 2 päivän ajan ennen verinäytteen ottamista. Jos potilas otti lääkitystä mistä tahansa syystä, siitä on ilmoitettava laboratorion avustajalle (tiettyjen lääkkeiden käyttö aiheuttaa virheellisesti positiivisen tuloksen).

    PCR-tutkimusten tulosten dekoodaus

    ELISA- ja PCR-analyysien salaaminen on tehtävä hepatologille tai tartuntatautien asiantuntijalle. Biopsian, veren biokemiallisen analyysin ja ultraäänitulokset vaaditaan myös. Koodata PCR-analyysin tulokset voi olla vain pätevä lääkäri, jonka tulee määrätä hoito heidän perusteella. Taulukot viruskuorman dekoodaamiseksi hepatiitti C: llä on esitetty alla.

    Laadullinen analyysi. Salauksen purkaminen

    havaittuPotilas on tartunnan saanut, koska viruksen RNA, joka löytyy sen biologisesta materiaalista.
    Ei havaittuPotilas ei ole tartunnan saanut tai viruksen RNA: n määrä on alle herkkyysrajan.

    Kvantitatiivinen analyysi. Salauksen purkaminen

    Ei havaittuHenkilö on terve. Virus RNA: ta ei löydy biomateriaalista tai sen pitoisuus on alle herkkyysrajan.
    Enintään 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlViruksen RNA: n konsentraatio on alle kvantitointialueen. Tässä tapauksessa tulosta tulkittaessa on noudatettava varovaisuutta. Toistuvaa tutkimusta vaaditaan usein..
    Enintään 8 * 10 ^ 5 IU / mlMatala viruskuormitus hepatiitti C: ssä. Viruksen pitoisuuden lasku osoittaa pääsääntöisesti onnistuneen hoidon.
    Suurempi kuin 8 * 10 ^ 5 IU / mlKorkea hepatiitti C-viruskuormitus.
    Suurempi kuin 2,4 * 10 ^ 7 IU / mlKoska viruksen RNA: n määrä on kvantifiointialueen ylärajan ulkopuolella, viruskuormituksen tasoa ei voida määrittää. Tarvitse toistuva testi laimentamalla verinäyte.

    Tietyn genotyypin havaittu RNATiettyyn genotyyppiin ja alatyyppiin kuuluva hepatiitti C-virus löydettiin potilaan biomateriaalista. Tulos ilmoitetaan numeroilla ja latinalaisilla kirjaimilla: 1a, 2b jne. Siellä on 7 genotyyppiä ja 67 alatyyppiä. Seitsemästä genotyypistä kolme ensimmäistä löytyy Venäjältä.
    Hepatiitti C -viruksen RNA havaittuVenäjän epätyypillisen viruksen genotyypin RNA löydettiin potilaan biomateriaalista, joten tarvitaan lisätutkimuksia.
    Ei havaittuHenkilö on terve tai hänen veressään on erittäin alhainen virus-RNA-pitoisuus.

    Joskus PCR-analyysi on negatiivinen, mutta ELISA-testi osoittaa vasta-aineiden esiintymisen virukselle. Tämä tarkoittaa, että henkilö, jolla on ollut akuutti hepatiitti C, on pystynyt toipumaan yksinään. Noin 20 tartuntatapausta, joilla tartunnan kehon voimakas vastustuskyky päättyy spontaaniin paranemiseen.

    Joissakin tilanteissa korkean tarkkuuden PCR-analyysin tulokset saattavat vääristyä:

    1. Lämpötila- ja muiden ehtojen rikkomukset veren kuljettamiseksi laboratorioon.
    2. Verinäytteen saastuminen.
    3. Hepariinin ja muiden antikoagulanttien jäämien esiintyminen veressä.
    4. Inhibiittorien läsnäolo biomateriaalissa (polymeraasiketjureaktio hidastuu tai pysähtyy).

    PCR-analyysin edut

    Ensinnäkin tämä on varhainen diagnoosimenetelmä, jonka avulla voit tunnistaa viruksen geneettisen materiaalin. ELISA-analyysi pystyy määrittämään vain aineet, joita elimistö tuottaa vasteena infektioille (immunoglobuliinit). Hepatiitti C -infektiosta hetkestä immuunivasteen alkamiseen voi kulua useita viikkoja tai jopa kuukausia, ja tänä aikana ELISA on tehoton. PCR-analyysi jo ensimmäisen infektion viikon aikana antaa vastauksen.

    PCR-analyysin toinen etu on pieni virhetodennäköisyys. Tutkimuksessa määritetään osa geenimateriaalista, joka on ominaista vain yhdelle patogeenityypille, mikä mahdollistaa väärän tuloksen sulkemisen pois. ELISA-analyysi osoittaa vasta-aineiden esiintymisen, jotka vapautuvat eri viruksia vastaan ​​(ristikkäiset vasta-aineet).

    PCR: n haitat

    Tutkimuksesta riippumatta sillä on haittoja:

    • Kiinan tutkimuksen aikana patogeenien (mukaan lukien elottomat) geneettinen materiaali toistuu, ja tämä johtaa tulosten vääristymiseen. PCR-analyysin avulla tehdyn hoidon tehokkuuden arvioimiseksi suoritetaan toinen tutkimus vähintään 2 kuukautta edellisen jälkeen. Potilaan keho on "puhdistettava" kuolleista viruksista.
    • Testijärjestelmät määrittävät virusgenomin sen osan, joka voi teoreettisesti kuulua muihin viruksiin tai mikro-organismeihin, joten on olemassa virheellisen positiivisen tuloksen mahdollisuus.
    • Virusten nopea mutaatio toisinaan ylittää testijärjestelmien kyvyn määrittää patogeenin perimä, joten on mahdollista väärää negatiivista vastausta.

    Laboratoriotestijärjestelmien valmistajat testaavat niitä säännöllisesti, selvittäen kuinka järjestelmät reagoivat ristireaktioihin tai viruksen genotyyppiin..

    Hepatiitti C: n PCR-analyysin hinta

    Hallituslaitoksissa analyysi voidaan tehdä ilmaiseksi, vaaditaan vain hepatologin tai tartuntataudin asiantuntijan lähettämä asiakirja.

    Maksettua tutkimusta on saatavana kaikissa Venäjän federaation suurimmissa kaupungeissa. Hintaan vaikuttavat tutkimuksen tyyppi, käytetyt laitteet, analysointiin tarvittava aika.

    Moskovassa ja Pietarissa korkealaatuinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle maksaa 600–900 ruplaa, alueella - 300–800 ruplaa.

    Hepatiitti C: n kvantitatiivinen PCR-analyysi maksaa 17 000 - 22 000 ruplaa, hepatiitti B: n - 1 200 - 10 000 ruplaa.

    Saadaksesi luotettavia tuloksia hepatiitti C: n PCR-analyysistä, ota yhteyttä vain hyvämaineisiin laboratorioihin. Tässä tapauksessa kysymys tutkimuksen kustannuksista katoaa taustalle.